本文選題：TFL + 多克隆抗體�。� 參考：《河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報》2017年02期

【摘要】：為了獲得敏感性和特異性高的TFL1多克隆抗體,本研究構(gòu)建了GST-TFL1和His-TFL1原核表達(dá)載體并轉(zhuǎn)入大腸桿菌表達(dá)菌株BL21中。經(jīng)IPTG誘導(dǎo)和蛋白純化,成功獲得了分子量約為46kD的GST-TFL1和22kD的His-TFL1融合蛋白。利用純化的融合蛋白His-TFL1作為抗原免疫,獲得了TFL1的多克隆抗體血清。抗體血清經(jīng)偶聯(lián)了GST-TFL1融合蛋白的純化基質(zhì)進(jìn)行免疫親和純化獲得了純化的TFL1多克隆抗體。免疫印跡檢測抗體敏感性和特異性發(fā)現(xiàn),純化后的抗體不僅能特異地識別細(xì)菌內(nèi)純化的GST-TFL1和His-TFL1融合蛋白,也能與擬南芥中TFL1蛋白發(fā)生特異性反應(yīng)。該研究結(jié)果為深入研究TFL1抑制植物開花的分子機(jī)制提供了有力的工具。
[Abstract]:In order to obtain high sensitivity and specificity of TFL1 polyclonal antibody, GST-TFL1 and His-TFL1 prokaryotic expression vectors were constructed and transferred into Escherichia coli expression strain BL21. GST-TFL1 and His-TFL1 fusion proteins with molecular weight of about 46kD and 22kD were successfully obtained by IPTG induction and protein purification. Using the purified fusion protein His-TFL1 as antigen, the polyclonal antibody serum of TFL1 was obtained. The purified TFL1 polyclonal antibody was obtained by immuno-affinity purification of the purified matrix of GST-TFL1 fusion protein. Immunoblotting assay showed that the purified antibody could not only specifically recognize the purified GST-TFL1 and His-TFL1 fusion proteins, but also react specifically with TFL1 protein in Arabidopsis thaliana. The results provide a powerful tool for further study on the molecular mechanism of TFL1 inhibiting flowering.
【作者單位】： 華北理工大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院/基因組學(xué)和計算生物學(xué)研究中心;南京農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院;河北農(nóng)業(yè)大學(xué)真菌毒素與植物分子病理學(xué)實驗室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31401212) 河北省自然科學(xué)基金(C2014209134)
【分類號】：Q943.2

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本文編號：2056449