牛傳染性鼻氣管炎病毒gB基因熒光定量PCR檢測方法建立
本文選題:牛傳染性鼻氣管炎病毒 + 實(shí)時(shí)熒光定量PCR ; 參考:《中國動物傳染病學(xué)報(bào)》2017年04期
【摘要】:為建立檢測牛傳染性鼻氣管炎病毒(Bovine infectious rhinotracheitis virus,IBRV)gB基因的熒光定量PCR檢測方法,本研究根據(jù)gB基因序列,設(shè)計(jì)1對引物和相應(yīng)的TaqMan探針。建立和優(yōu)化反應(yīng)體系后,以10倍稀釋的病毒來檢測該方法的靈敏度。同時(shí),對偽狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)、馬立克病病毒(Marek’s disease virus,MDV)和鴨瘟病毒(Duck plague virus,DPV)進(jìn)行特異性檢測。結(jié)果表明,基于gB基因的熒光PCR檢測方法可用于鑒定IBRV,該方法具有較好的靈敏度和特異性,其靈敏度為10 copies/μL,即0.02 TCID_(50),且與其他病毒無交叉反應(yīng)。
[Abstract]:In order to establish a fluorescence quantitative PCR method for detecting the GB gene of bovine infectious rhinotracheitis virus (IBRV), a pair of primers and a corresponding TaqMan probe were designed according to the sequence of GB gene. After establishing and optimizing the reaction system, the sensitivity of the method was detected with 10 times dilution virus. At the same time, the specific detection of pseudorabies virus (PRV), Marekhos disease virus (MDV) and Duck plague virus (DPV) was carried out. The results showed that the method based on GB gene could be used to identify IBRV. The sensitivity of this method was 10 copies/ 渭 L, i.e. 0.02 TCID50, and there was no cross reaction with other viruses.
【作者單位】: 徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所;
【基金】:2014年徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院科研課題(2014B10)
【分類號】:S852.653
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,本文編號:2055320
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