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珊瑚菜葉綠體基因TrnV-M序列的PCR擴增與分析

發(fā)布時間:2018-06-20 12:01

  本文選題:珊瑚菜 + TrnV-M; 參考:《安徽農業(yè)科學》2016年33期


【摘要】:[目的]對珊瑚菜TrnV-M基因片段PCR擴增條件進行優(yōu)化和測序分析,為瀕危物種珊瑚菜的種質資源保護和遺傳多樣性研究提供理論依據。[方法]探索并優(yōu)化珊瑚菜葉綠體基因片段TrnV-M的PCR擴增條件,并對擴增產物進行測序分析。[結果]珊瑚菜TrnV-M基因片段的PCR最佳反應體系:d NTPs 0.50μL,Buffer 2.50μL,Trn M 1.25μL,TrnV 1.25μL,DNA 1.00μL,r Taq E 0.15μL,dd H2O 18.35μL,總體積25.00μL。最佳擴增程序:94℃預變性3.0 min;94℃變性50 s,58℃退火45 s,72℃延伸1 min 25 s,38個循環(huán);72℃延伸8 min。[結論]在最優(yōu)體系下獲得了清晰、穩(wěn)定的目的條帶,校正后條帶長度約為757 bp,通過Gen Bank的BLAST比對,確定為TrnV-M基因片段。
[Abstract]:[objective] to optimize the PCR amplification conditions and sequence analysis of TrnV-M gene fragment of Corallaria corallensis, so as to provide a theoretical basis for the conservation of germplasm resources and the study of genetic diversity of the endangered species. [methods] the PCR amplification conditions of TrnV-M chloroplast gene fragment were explored and optimized, and the PCR products were sequenced. [results] the optimal PCR reaction system of TrnV-M gene fragment in Corallaria corallis L. was: DNTPs 0.50 渭 L buffer 2.50 渭 L Trn 1.25 渭 L TrnV 1.25 渭 L DNA 1.00 渭 L Taq E 0.15 渭 L dd H 2O 18.35 渭 L, total volume 25.00 渭 L. The optimal amplification procedure was: predenaturation at: 94 鈩,

本文編號:2044188

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