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葡萄乙醛脫氫酶VvALDH10A9基因的克

發(fā)布時(shí)間:2018-06-20 05:00

  本文選題:葡萄 + 葡萄潰瘍病 ; 參考:《植物保護(hù)》2017年05期


【摘要】:由葡萄座腔菌科Botryosphaeriaceae真菌引起的葡萄潰瘍病Botryosphaeria dieback是葡萄上的主要枝干病害,嚴(yán)重影響葡萄產(chǎn)量和品質(zhì)。鑒定和分析參與葡萄與葡萄潰瘍病菌互作的基因,有助于揭示和闡明葡萄抗?jié)儾〉男盘?hào)通路。本研究根據(jù)葡萄潰瘍病菌侵染后的葡萄轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)信息,利用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(RTPCR)克隆了一個(gè)受葡萄潰瘍病菌誘導(dǎo)上調(diào)表達(dá)的乙醛脫氫酶基因VvALDH10A9(Vitis vinifera aldehyde dehydrogenase 10A9)。系統(tǒng)進(jìn)化樹分析表明,該基因編碼的蛋白與擬南芥AtALDH10A8親緣關(guān)系最近。利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析VvALDH10A9的表達(dá)結(jié)果表明:VvALDH10A9的表達(dá)具有組織特異性,在莖、葉和花中表達(dá)量最高,在根中表達(dá)量相對(duì)較低;葡萄潰瘍病菌侵染后,VvALDH10A9在葡萄抗病品種中表達(dá)變化不明顯,而在葡萄感病品種中該基因顯著上調(diào)表達(dá)。利用原核蛋白表達(dá)系統(tǒng)誘導(dǎo)合成的VvALDH10A9蛋白,經(jīng)純化后可降解乙醛,表明VvALDH10A9蛋白具有乙醛脫氫酶活性。
[Abstract]:Botryosphaeria dieback, which is caused by Botryosphaeriaceae fungi, is the main branch and stem disease of grape, which seriously affects the yield and quality of grape. Identification and analysis of the genes involved in the interaction of grape ulcer pathogen may help to reveal and clarify the signaling pathway of grape resistance to ulcerative disease. In this study, based on the transcriptional data of grape infected by Grape ulcer pathogen, a gene VvALDH10A9Vitis vinifera aldehyde dehydrogenase 10A9 was cloned by reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). Phylogenetic tree analysis showed that the protein encoded by the gene was closely related to Arabidopsis thaliana AtALDH10A8. The expression of VvALDH10A9 was analyzed by real-time fluorescence quantitative PCR. The results showed that the expression of VvALDH10A9 was tissue specific, the highest in stem, leaf and flower, and the lower in root. The expression of VvALDH10A9 was not significantly changed in resistant grape varieties after infection, but it was upregulated significantly in susceptible grape varieties. VvALDH10A9 protein was induced by prokaryotic expression system and degraded to acetaldehyde after purification, indicating that VvALDH10A9 protein has acetaldehyde dehydrogenase activity.
【作者單位】: 北京市農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)環(huán)境保護(hù)研究所;
【基金】:國(guó)家葡萄產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS-30) 北京市博士后工作經(jīng)費(fèi) 北京市農(nóng)林科學(xué)院博士后基金
【分類號(hào)】:S436.631.1

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本文編號(hào):2043062

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