本文選題：Valsa + mali　； 參考：《微生物學(xué)報》2016年08期

【摘要】：【目的】非核糖體多肽合成酶(NRPS)在植物病原真菌與其寄主互作過程中發(fā)揮著重要作用,明確Vm NRPS12基因在蘋果樹腐爛病菌致病過程中的功能,將為今后深入研究蘋果樹腐爛病菌NRPS作用機(jī)制提供理論依據(jù)。【方法】基于蘋果樹腐爛病菌全基因組數(shù)據(jù),得到VmNRPS12基因。運(yùn)用qRT-PCR技術(shù)分析VmNRPS12在侵染初期的表達(dá)水平,利用Double-joint PCR和PEG介導(dǎo)的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化獲得該基因抗潮霉素的突變體,對突變體進(jìn)行PCR檢測及Southern blot驗證得到敲除突變體,進(jìn)一步通過重新導(dǎo)入該基因全長片段獲得互補(bǔ)突變體,最后對野生型、敲除突變體和互補(bǔ)突變體進(jìn)行菌落、產(chǎn)孢及致病力觀察,對檢測數(shù)據(jù)用SPSS軟件進(jìn)行差異顯著性分析�！窘Y(jié)果】定量分析顯示該基因在侵染初期顯著上調(diào)表達(dá),且接種48 h后的表達(dá)量是對照的138.6倍。該基因的敲除突變體在營養(yǎng)生長及產(chǎn)孢方面與野生型菌株03-8相比無顯著性差異,但致病力與野生型菌株03-8相比顯著減弱,且互補(bǔ)突變體致病力近似恢復(fù)至野生型水平�！窘Y(jié)論】VmNRPS12基因與蘋果樹腐爛病菌致病性相關(guān)。
[Abstract]:[objective] Non-ribosomal polypeptide synthase (NRPS) plays an important role in the interaction between plant pathogenic fungi and its host, and the function of Vm NRPS12 gene in the pathogenicity of apple tree rot pathogen is clarified. It will provide a theoretical basis for further study on the mechanism of NRPS in apple tree rot pathogen. [methods] VmNRPS12 gene was obtained based on the whole genome data of apple tree rot pathogen. The expression level of VmNRPS12 in the early stage of infection was analyzed by qRT-PCR. The mutant resistant to hygromycin was obtained by Double-joint PCR and PEG-mediated protoplast transformation. The mutant was detected by PCR and Southern blot validation. Further, the complementary mutants were obtained by reintroducing the full-length fragment of the gene, and the colony, sporulation and pathogenicity of wild type, knockout mutants and complementary mutants were observed. [results] quantitative analysis showed that the expression of the gene was significantly up-regulated at the early stage of infection, and the expression level was 138.6 times higher than that of the control 48 h after inoculation. There was no significant difference between the knockout mutant and wild strain 03-8 in vegetative growth and sporulation, but the pathogenicity of the mutant was significantly weaker than that of wild strain 03-8. And the pathogenicity of the complementary mutants was approximately restored to the wild-type level. [conclusion] VmNRPS12 gene is related to the pathogenicity of apple tree rot bacteria.
【作者單位】： 西北農(nóng)林科技大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院 旱區(qū)作物逆境生物學(xué)國家重點實驗室;
【基金】：公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(201203034) 國家自然科學(xué)基金(31171796) Ⅲ計劃(B07049)~~
【分類號】：S436.611.11

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本文編號：2034830