偽狂犬病毒gE、gI和US9三基因缺失株的構(gòu)建
本文選題:偽狂犬 + gE/gI/US; 參考:《浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)》2017年04期
【摘要】:偽狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)是一種皰疹病毒,在自然界具有極廣泛的宿主類群,是中國養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展主要威脅之一。為了研究病毒的神經(jīng)傳導(dǎo)機(jī)制,實(shí)驗(yàn)采用Lipofectamine湟3 000轉(zhuǎn)染試劑,將PP63質(zhì)粒與偽狂犬病毒Fa株基因組DNA共轉(zhuǎn)染BHK-21細(xì)胞,空斑篩選得到gI/gE/US9重組缺失病毒,并命名為SA215-T。采用PCR、基因測(cè)序、Western Blot、電鏡檢查和生長曲線測(cè)定等方法檢測(cè)重組病毒PRV-SA215-T。研究結(jié)果顯示,Western Blot未發(fā)現(xiàn)gE基因的表達(dá),SA215-T株的電鏡形態(tài)與野毒株無明顯差異,SA215-T株與親本毒株Fa株在細(xì)胞中的生長曲線差異不明顯且均達(dá)到了較高的病毒滴度。
[Abstract]:Pseudorabies virus (PRV) is a kind of herpesvirus, which has a wide host group in nature and is one of the main threats to the development of pig industry in China. In order to study the neural transmission mechanism of the virus, PP63 plasmid and pseudorabies virus Fa strain genomic DNA were co-transfected into BHK-21 cells by Lipofectamine Huang 3000 transfection reagent. The recombinant deletion virus was screened by plaque screening and named SA215-T. The recombinant virus PRV-SA215-T was detected by PCR, Western blot, electron microscopy and growth curve analysis. The results showed that the expression of GE gene in SA215-T strain was not significantly different from that of wild strain by Western Blot. The growth curve of SA215-T strain and parent strain Fa strain were not obvious and reached high titer.
【作者單位】: 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院;四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物疫病與人類健康四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國家“十二五”科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2015BAD12B04) 四川省科技支撐計(jì)劃(2014NZ0043,2017NZ0038) 長江學(xué)者與創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)發(fā)展計(jì)劃(IRT13083)
【分類號(hào)】:S852.655
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