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轉(zhuǎn)GGCX基因治療兔骨性關(guān)節(jié)炎的體外實驗研究

發(fā)布時間:2018-06-07 06:51

  本文選題:軟骨 + 關(guān)節(jié); 參考:《重慶醫(yī)學(xué)》2017年04期


【摘要】:目的探索GGCX基因?qū)ν霉切躁P(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞MMP13的影響及其在兔骨性關(guān)節(jié)炎軟骨退變中的作用。方法取體質(zhì)量(2.0±0.2)kg日本大耳兔6只,隨機分為3組,每組設(shè)立一只對照兔,分別在2、4、6周使用膝前交叉韌帶切斷術(shù)構(gòu)建模型,6周后模型兔構(gòu)建成功,分離關(guān)節(jié)軟骨,經(jīng)消化分離后將軟骨細(xì)胞接種到6孔細(xì)胞培養(yǎng)板,將軟骨細(xì)胞分為空白組、陰性對照組(轉(zhuǎn)染不含GGCX基因慢病毒)、轉(zhuǎn)染組(轉(zhuǎn)染含GGCX基因慢病毒)3組。轉(zhuǎn)染組則均以LipofectamineTM2000為轉(zhuǎn)染媒介。用PCR法及蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測GGCX和MMP13的表達(dá)。結(jié)果轉(zhuǎn)染組GGCX有較高的表達(dá)水平;轉(zhuǎn)染組MMP13的表達(dá)水平降低,且二者與空白組及陰性對照組比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 GGCX基因過表達(dá)可明顯降低其軟骨細(xì)胞MMP13的表達(dá),為將基因治療運用于體外骨性關(guān)節(jié)炎提供實驗基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of GGCX gene on MMP13 in rabbit osteoarthritis chondrocytes and its role in osteoarthritis cartilage degeneration. Methods six Japanese large ear rabbits with 2.0 鹵0.2)kg body mass were randomly divided into 3 groups. Each group was divided into 3 groups, each group was divided into 3 groups. The model was constructed 6 weeks after the operation of anterior cruciate ligament (ACL), and the articular cartilage was separated. After digestion and isolation, chondrocytes were inoculated into 6-well cell culture plate. Chondrocytes were divided into blank group, negative control group (transfection without GGCX gene lentivirus) and transfection group (transfected with GGCX gene lentivirus). In the transfection group, LipofectamineTM2000 was used as the transfection medium. The expression of GGCX and MMP13 was detected by PCR and Western blotting. Results the expression of GGCX in the transfected group was higher than that in the control group, and the expression level of MMP13 in the transfected group was lower than that in the blank group and the negative control group (P 0.05). Conclusion overexpression of GGCX gene can significantly reduce the expression of MMP13 in chondrocytes and provide experimental basis for the application of gene therapy in osteoarthritis in vitro.
【作者單位】: 南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院骨科;
【基金】:國家自然基金資助項目(81301561)
【分類號】:R684.3

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本文編號:1990270

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