本文選題：Lgr5 + 食管鱗癌��； 參考：《鄭州大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：背景食管癌作為世界上第八大常見(jiàn)的惡性腫瘤,死亡率占世界第六位。在亞洲,食管鱗癌作為最主要的組織學(xué)類型,其5年生存率30%。目前主要以化療,放療,手術(shù),靶向療法來(lái)治療食管鱗癌,但許多食管鱗癌病人仍出現(xiàn)疾病的復(fù)發(fā)、進(jìn)展和較差的預(yù)后。越來(lái)越多的證據(jù)證實(shí)腫瘤干細(xì)胞會(huì)導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生、進(jìn)展、治療耐藥和遠(yuǎn)距離轉(zhuǎn)移。腫瘤干細(xì)胞被認(rèn)為是腫瘤組織中具有自我更新增殖、多向分化的潛能以及可導(dǎo)致腫瘤形成進(jìn)展的生物學(xué)特性的一小部分未分化細(xì)胞。大量證據(jù)證實(shí)富集和維持腫瘤干細(xì)胞特性可以通過(guò)低粘附無(wú)血清懸浮培養(yǎng)形成成球細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞分選術(shù)分離腫瘤干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、腫瘤干細(xì)胞特異性表面標(biāo)記物來(lái)獲得。Lgr5作為一種G蛋白偶聯(lián)受體,是Wnt信號(hào)通路的靶向調(diào)節(jié)基因。Lgr5由17個(gè)富含亮氨酸的重復(fù)單位和7個(gè)跨膜區(qū)域組成,具有GPCRs家族的典型特征。Barker等學(xué)者發(fā)現(xiàn)Lgr5表達(dá)于小腸和結(jié)腸的隱窩底部,經(jīng)過(guò)單一分選的Lgr5表達(dá)陽(yáng)性的隱窩底柱狀細(xì)胞可以形成隱窩絨毛類器官。因此證實(shí)Lgr5可被認(rèn)為是小腸干細(xì)胞和結(jié)腸干細(xì)胞的特異性標(biāo)記物。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)Lgr5在多種腫瘤中呈高表達(dá),如結(jié)腸癌、肝癌、卵巢癌、腦膠質(zhì)瘤、基底細(xì)胞癌和胃癌等。Wnt/β-catenin信號(hào)通路在正常干細(xì)胞以及腫瘤干細(xì)胞中均起著至關(guān)重要的作用,同時(shí)被異常激活的Wnt/β-catenin通路與食管鱗癌等腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)。目的1.探討分析干性基因Lgr5在食管鱗癌組織、食管鱗癌細(xì)胞和具有干性較強(qiáng)的食管鱗癌成球細(xì)胞中的表達(dá)及臨床意義;2.通過(guò)腫瘤干細(xì)胞相關(guān)基因在食管鱗癌成球細(xì)胞中的過(guò)高表達(dá)和較高的裸鼠體內(nèi)成瘤能力證實(shí)食管鱗癌成球細(xì)胞具備較高的干細(xì)胞特性;3.采用siRNA使Lgr5的表達(dá)降低,分析食管鱗癌細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲能力、干細(xì)胞基因表達(dá)以及Wnt/β-catenin信號(hào)通路相關(guān)分子表達(dá)能力的變化。方法采用免疫組織化學(xué)法(IHC)檢測(cè)280例食管鱗癌組織和150例癌旁組織中Lgr5的蛋白表達(dá)水平;Kaplan-Meier分析法分析食管鱗癌患者的生存預(yù)后;低黏附懸浮培養(yǎng)法培養(yǎng)食管鱗癌細(xì)胞系KYSE450形成成球細(xì)胞;Quantitative real-time PCR(qRT-PCR)、Western Blot法檢測(cè)干性相關(guān)基因以及Lgr5在親代細(xì)胞和成球細(xì)胞中的表達(dá)差異;BALB/c裸鼠體內(nèi)注射親代細(xì)胞和成球細(xì)胞檢測(cè)成球細(xì)胞干性;應(yīng)用Lgr5 siRNA瞬時(shí)轉(zhuǎn)染KYSE450細(xì)胞系后,CCK8檢測(cè)細(xì)胞增殖、Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的遷移和侵襲能力,qRT-PCR、Western Blot法檢測(cè)干性相關(guān)基因和Wnt/β-catenin信號(hào)通路相關(guān)分子的表達(dá)水平變化。結(jié)果1.Lgr5在食管鱗癌組織中的表達(dá)水平明顯高于癌旁正常食管組織;且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)深度、腫塊大小、分化程度、腫瘤分期和較差的預(yù)后密切相關(guān);2.在食管鱗癌成球細(xì)胞中Lgr5和腫瘤干細(xì)胞相關(guān)基因均呈高表達(dá)水平;3.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)成球細(xì)胞具有較高的致瘤能力;4.沉默Lgr5的表達(dá)可以抑制食管鱗癌細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲能力;5.沉默Lgr5的表達(dá)可以降低腫瘤干細(xì)胞相關(guān)基因SOX2、ALDH1A1、NANOG的表達(dá);6.沉默Lgr5的表達(dá)可以降低β-catenin及其Wnt/β-catenin信號(hào)通路重要的分子cyclinD1、c-Myc的表達(dá)。結(jié)論Lgr5可能是食管鱗癌發(fā)生、復(fù)發(fā)、進(jìn)展、侵襲轉(zhuǎn)移的標(biāo)志之一,Lgr5呈高表達(dá)的食管鱗癌細(xì)胞可能具有腫瘤干細(xì)胞樣特性,并且可能通過(guò)Wnt/β-catenin信號(hào)通路調(diào)節(jié)食管鱗癌的干性。因此,Lgr5可能為食管鱗癌干細(xì)胞的一個(gè)重要表面標(biāo)記物,并且可能成為治療食管鱗癌的一個(gè)重要分子靶點(diǎn)。
[Abstract]:In recent years , the expression of Lgr5 in esophageal squamous cell carcinoma ( SCC ) , esophageal squamous cell carcinoma ( SCC ) and esophageal squamous cell carcinoma ( SCC ) has been demonstrated . Conclusion Lgr5 may be an important marker of esophageal squamous cell carcinoma , and may be an important molecular target for the treatment of esophageal squamous cell carcinoma .
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R735.1

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 ;Side population cells isolated from KATO Ⅲ human gastric cancer cell line have cancer stem cell-like characteristics[J];World Journal of Gastroenterology;2012年33期

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本文編號(hào)：1981452