本文選題：胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白 + 多發(fā)性骨髓瘤　； 參考：《中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志》2017年03期

【摘要】：目的:研究多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株U266中胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白7(IGFBP7)的表達(dá)及甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑5-氮雜-2'-脫氧胞苷(5-aza-dc)對(duì)其增殖的影響。方法:體外培養(yǎng)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株U266,并以健康查體者的骨髓單個(gè)核細(xì)胞(N-BMMNC)作為正常對(duì)照,提取RNA,采用實(shí)時(shí)RT-PCR檢測(cè)IGFBP7的表達(dá),提取細(xì)胞DNA甲基化修飾后采用甲基化特異性PCR(MSP)分析其CpG島的甲基化狀態(tài),不同濃度的甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑5-aza-dc(5、10和20μmol/L)處理U266細(xì)胞株,在48 h收集細(xì)胞,用實(shí)時(shí)RT-PCR和蛋白印跡法檢測(cè)各組IGFBP7 mRNA和蛋白表達(dá),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)藥物處理前后各組細(xì)胞的細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期。結(jié)果:U266細(xì)胞IGFBP7 mRNA表達(dá)較正常骨髓細(xì)胞降低;MSP檢測(cè)顯示U266 IGFBP7的啟動(dòng)子CpG島明顯甲基化;不同濃度的5-aza-dc處理U266細(xì)胞株48 h后,IGFBP7的mRNA表達(dá)呈劑量依賴性增高(r=0.952,P0.05),IGFBP7蛋白表達(dá)呈劑量依賴性增高(r=0.983,P0.05);隨著藥物濃度增高,U266在G_0/G_1期細(xì)胞逐漸增多(r=0.966),細(xì)胞凋亡率逐漸增加(r=0.958)。結(jié)論:U266細(xì)胞中IGFBP7 mRNA較N-BMMNC低表達(dá),與CpG島的異常甲基化相關(guān),5-aza-dc可以使U266細(xì)胞中IGFBP7mRNA和蛋白表達(dá)恢復(fù),并通過阻滯細(xì)胞周期和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡發(fā)揮其對(duì)U266細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用
[Abstract]:Aim: to investigate the expression of insulin-like growth factor binding protein (IGFBP7) in multiple myeloma cell line U266 and the effect of 5-aza-dc), a methyltransferase inhibitor, on its proliferation. Methods: multiple myeloma cell line U266 was cultured in vitro, and bone marrow mononuclear cells (N-BMMNCs) of healthy examiners were used as normal control. IGFBP7 expression was detected by real-time RT-PCR. DNA methylation modification was used to analyze the methylation status of CpG islands in U266 cells. Different concentrations of methyltransferase inhibitor 5-aza-dccct5 and 20 渭 mol / L were treated to U266 cell lines, and the cells were collected at 48 h. Real-time RT-PCR and Western blot were used to detect the expression of IGFBP7 mRNA and protein in each group. Flow cytometry was used to detect cell apoptosis and cell cycle before and after drug treatment. Results compared with normal bone marrow cells, the IGFBP7 mRNA expression of U266 cells was significantly lower than that of normal bone marrow cells. The promoter CpG island of U266 IGFBP7 was significantly methylated. The expression of IGFBP7 in U266 cells was increased in a dose-dependent manner after 48 h treatment with different concentrations of 5-aza-dc. The expression of IGFBP7 protein in U266 cells was increased in a dose-dependent manner, and the apoptosis rate of U266 cells increased in a dose-dependent manner. Conclusion the expression of IGFBP7 mRNA in U266 cells is lower than that of N-BMMNC, and 5-aza-dc associated with abnormal methylation of CpG island can restore the expression of IGFBP7mRNA and protein in U266 cells, and exert its inhibitory effect on the growth of U266 cells by blocking cell cycle and inducing apoptosis.
【作者單位】： 山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院血液科;
【基金】：山西省衛(wèi)生計(jì)生委科研課題(2015041)
【分類號(hào)】：R733.3

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本文編號(hào)：1975249