發(fā)布時(shí)間：2018-06-04 00:31

  本文選題：轉(zhuǎn)基因棉花 + CP-EPSPS�。� 參考：《生物技術(shù)通報(bào)》2017年04期

【摘要】：CP4-EPSPS是從土壤農(nóng)桿菌CP4菌株中分離得到的抗除草劑草甘膦基因,是轉(zhuǎn)基因植物研究中最為常用的一種篩選標(biāo)記基因。但是在CP4-EPSPS轉(zhuǎn)基因植物后期篩選過(guò)程中僅憑簡(jiǎn)單的草甘膦抗性篩選并不能得到完全準(zhǔn)確的鑒定結(jié)果,常會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性或漏選的情況。本研究以抗草甘膦轉(zhuǎn)CP4-EPSPS基因棉花為材料,對(duì)PCR擴(kuò)增、ELISA、CP4-EPSPS蛋白檢測(cè)試紙條及草甘膦抗性四種轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性植株篩選方法進(jìn)行比較,從篩選結(jié)果的準(zhǔn)確性、時(shí)效性、易用性及實(shí)惠性等不同方面綜合分析了各種篩選方法的優(yōu)缺點(diǎn),結(jié)果表明ELISA、試紙條檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性顯著高于PCR檢測(cè)與0.3%濃度草甘膦抗性檢測(cè),而試紙條檢測(cè)操作更加便捷,因此建議將草甘膦抗性與試紙條檢測(cè)方法結(jié)合起來(lái)使用。本研究結(jié)果為以CP4-EPSPS基因?yàn)闃?biāo)記篩選的轉(zhuǎn)基因植物的室內(nèi)及大田篩選提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
[Abstract]:CP4-EPSPS is a herbicide resistant glyphosate gene isolated from soil Agrobacterium tumefaciens CP4. It is one of the most commonly used screening marker genes in transgenic plant studies. However, in the late screening process of CP4-EPSPS transgenic plants, only simple glyphosate resistance can not be obtained by simple glyphosate resistance. False positive or leaky selection. In this study, CP4-EPSPS transgenic cotton was used as the material. The screening methods of PCR amplification, ELISA, CP4-EPSPS protein test paper and glyphosate resistance four transgenic positive plants were compared. The results were analyzed from different aspects, such as accuracy, timeliness, ease of use and benefits. The advantages and disadvantages of the screening method show that the accuracy of the test paper detection method is significantly higher than that of PCR detection and 0.3% concentration of glyphosate resistance detection, and the test strip detection operation is more convenient. Therefore, it is suggested to combine the glyphosate resistance with the test paper detection method. The results of this study are selected by the CP4-EPSPS gene as a marker. Laboratory and field screening of transgenic plants provides experimental evidence.
【作者單位】： 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所;
【基金】：國(guó)家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育科技重大專項(xiàng)資助項(xiàng)目(2016ZX08005-004)
【分類號(hào)】：S562

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本文編號(hào)：1974973