本文選題：大白菜 + 小孢子��； 參考：《園藝學(xué)報》2017年01期

【摘要】：圍繞基因槍微粒的制備、大白菜小孢子對基因槍轟擊的耐受能力以及小孢子的胚胎發(fā)生能力開展研究,初步建立了以小孢子為外植體的遺傳轉(zhuǎn)化體系。高胚胎發(fā)生的大白菜材料‘CC-4’的小孢子在基因槍7.58×10~6 Pa爆破壓力,9 cm的轟擊距離下,利用直徑0.6μm,亞精胺包裹的金粒子微彈以每次500μg的金粒子量連續(xù)轟擊5次,小孢子活力不受影響,培養(yǎng)1 d后GUS基因瞬時表達(dá)檢測,平均每皿可獲得20個以上轉(zhuǎn)化小孢子;小孢子培養(yǎng)15 d后成功獲得胚狀體,GUS基因瞬時表達(dá)檢測,平均每皿最多獲得4個遺傳轉(zhuǎn)化的胚狀體,40個花蕾可獲得20個以上轉(zhuǎn)化胚狀體。初步探討基因槍法介導(dǎo)大白菜小孢子結(jié)果表明:大白菜小孢子數(shù)量龐大易收集,可耐受基因槍的多次轟擊,并能繼續(xù)保持胚胎發(fā)生的能力,作為新嘗試的遺傳轉(zhuǎn)化受體,有可能是解決白菜類作物再生困難,提高轉(zhuǎn)基因效率的有效手段。
[Abstract]:The microspore tolerance to bombardment and embryogenesis of microspores in Chinese cabbage were studied. A genetic transformation system with microspore as explant was established. Under the bombardment distance of 7.58 脳 10 ~ (6) Pa blasting pressure of a gene gun, the microspore of Chinese cabbage material CC-4 'with high embryogenesis was bombarded five times with the amount of gold particles of 500 渭 g each time using 0.6 渭 m in diameter. The activity of microspore was not affected, the transient expression of GUS gene was detected after 1 day culture, the average of transformed microspore was more than 20 per dish, and the transient expression of Gus gene in embryoid was detected successfully after 15 days of microspore culture. An average of 4 transformed embryoids were obtained per dish, and more than 20 transformed embryoids were obtained from 40 flower buds. The results of preliminary study on microspore mediated by gene gunshot in Chinese cabbage showed that the large number of microspores in Chinese cabbage was easy to collect and could withstand multiple bombardment by gene gun, and could continue to maintain the ability of embryogenesis as a new type of genetic transformation receptor. It may be an effective means to solve the difficulty of regeneration of cabbage crops and to improve the efficiency of transgenic plants.
【作者單位】： 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所;中國農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院;
【基金】：國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(2016YFD0101701) 農(nóng)業(yè)部園藝作物生物學(xué)與種質(zhì)創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目
【分類號】：S634.1

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本文編號：1973145