CYP2C19基因多態(tài)性熒光定量PCR檢測方法的建立
本文選題:細胞色素p + 基因多態(tài)性; 參考:《臨床檢驗雜志》2016年02期
【摘要】:目的建立檢測人細胞色素氧化酶2C19(CYP2C19)基因多態(tài)性的熒光定量PCR檢測方法。方法用Primer Premier5.0和Primer Express 3.0軟件針對人CYP2C19基因681和636多態(tài)性位點分別設(shè)計1對引物和2條Taq Man-MGB探針,優(yōu)化建立熒光PCR反應(yīng)體系。評價該方法的準確性、靈敏度和重復(fù)性。用該方法檢測300例臨床樣本,并用測序法進行驗證。結(jié)果建立CYP2C19基因681和636位點熒光PCR檢測方法,靈敏度為每個反應(yīng)2 ng/g DNA。300例臨床樣本檢測結(jié)果與測序法一致性為100%。結(jié)論建立的CYP2C19基因多態(tài)性熒光PCR檢測法準確性較高、靈敏度和重復(fù)性較好,適于臨床實驗研究。
[Abstract]:Objective to establish a fluorescence quantitative PCR method for the detection of CYP2C19 gene polymorphisms in human cytochrome oxidase 2C19. Methods A pair of primers and two Taq Man-MGB probes were designed for 681 and 636 polymorphic sites of human CYP2C19 gene by Primer Premier5.0 and Primer Express 3.0 software respectively. The fluorescent PCR reaction system was optimized. Evaluate the accuracy, sensitivity and repeatability of the method. This method was used to detect 300 clinical samples and to be verified by sequencing. Results A fluorescence PCR method for the detection of 681 and 636 loci of CYP2C19 gene was established. The sensitivity was 100% for each reaction 2 ng/g DNA.300 samples and the sequencing method. Conclusion the established CYP2C19 gene polymorphism fluorescence PCR assay has high accuracy, sensitivity and reproducibility, and is suitable for clinical study.
【作者單位】: 深圳市第二人民醫(yī)院檢驗科;
【分類號】:R440
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,本文編號:1972700
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