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淇河鯽肌肉生長抑制素基因的克隆與表達(dá)

發(fā)布時間:2018-05-31 14:10

  本文選題:淇河鯽 + 肌肉生長抑制素; 參考:《水產(chǎn)學(xué)報》2017年01期


【摘要】:肌肉生長抑制素(MSTN)是動物肌肉發(fā)育和生長過程中的負(fù)調(diào)控因子。為了明確淇河鯽MSTN基因序列及其在肌肉生長發(fā)育中的調(diào)控功能,本研究利用RACE方法克隆淇河鯽MSTN全長c DNA序列,q RT-PCR分析其在不同組織和胚胎發(fā)育階段的表達(dá)情況。結(jié)果顯示,淇河鯽MSTN c DNA序列全長2094 bp(no.KC851952.1),包含86 bp 5′非編碼區(qū)、880 bp 3′非編碼區(qū)和1128 bp開放閱讀框,編碼375個氨基酸殘基,前22個氨基酸殘基為信號肽,34~256位氨基酸殘基為TGF-β前肽域,281~375是TGF-β結(jié)構(gòu)域,具蛋白酶水解位點RIRR和C端生物活性區(qū)的9個保守半胱氨酸殘基。蛋白同源分析發(fā)現(xiàn)淇河鯽MSTN與鯉形目魚類相似性較高,與哺乳動物和鳥類的相似性最低。系統(tǒng)進(jìn)化分析顯示,淇河鯽MSTN與鯽、鯉、溼等鯉科魚類親緣關(guān)系較近。實時定量PCR分析表明,淇河鯽MSTN基因在各個組織中均有表達(dá),腦中表達(dá)量最高,其次為肌肉和肝臟,腸道表達(dá)量最低。淇河鯽胚胎發(fā)育的各階段MSTN基因均有表達(dá),受精卵表達(dá)量最高,其次為囊胚期,神經(jīng)胚期表達(dá)量最低。推測MSTN與淇河鯽肌肉發(fā)育生長具有一定的相關(guān)性,可能參與"雙背鯽"特征的形成。
[Abstract]:Muscle growth inhibitor (MSTN) is a negative regulatory factor during muscle development and growth. In order to identify the MSTN gene sequence of Qihe crucian carp and its regulatory function in muscle growth and development, we used RACE method to clone the full-length c DNA sequence of MSTN from Qihe crucian carp and analyze its expression in different tissues and embryonic development stages. The results showed that the MSTN c DNA sequence of Qihe crucian carp was 2094 BP no. KC851952.1, including 880bp 3'noncoding region of 880bp and 1128 BP open reading frame, encoding 375 amino acid residues. The first 22 amino acid residues were signal peptide motif 34,256 amino acid residues, which were TGF- 尾 propeptide domain (TGF- 尾) and TGF- 尾 domain, and 9 conserved cysteine residues with protease hydrolysis site (RIRR) and C-terminal biological active region. Protein homology analysis showed that the similarity between MSTN and Cyprinidae was higher than that with mammals and birds. Phylogenetic analysis showed that MSTN was closely related to Carassius Carpio, Cyprinus Carpio and Cyprinidae. Real-time quantitative PCR analysis showed that MSTN gene was expressed in all tissues of Qihe crucian carp, the highest in brain, the second in muscle and liver, and the lowest in intestinal tract. The expression of MSTN gene was the highest in fertilized eggs, followed by blastocyst stage, and the lowest in nerve embryo stage. It is speculated that MSTN has some correlation with muscle development and growth of Qihe crucian carp, which may be involved in the formation of the characteristics of "double back crucian carp".
【作者單位】: 河南師范大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院河南省水產(chǎn)動物養(yǎng)殖工程技術(shù)研究中心;周口科技職業(yè)學(xué)院醫(yī)學(xué)系;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(31402294) 河南省國際科技合作計劃項目(152102410040) 河南省科技攻關(guān)計劃項目(132102110135,1421022110145)~~
【分類號】:Q78;S917.4

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本文編號:1960012

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