本文選題：糙皮側(cè)耳 + 凝集素基因　； 參考：《菌物學(xué)報(bào)》2017年08期

【摘要】：凝集素在食用菌的生長(zhǎng)發(fā)育、抗病蟲等逆境及抗腫瘤等方面發(fā)揮著重要的作用,但是關(guān)于糙皮側(cè)耳凝集素基因的抗逆功能研究還比較薄弱。因此,本文利用PCR技術(shù)克隆得到糙皮側(cè)耳子實(shí)體凝集素polectin2基因及其啟動(dòng)子序列,測(cè)序和生物信息學(xué)結(jié)果顯示該基因不含內(nèi)含子,完整開放閱讀框?yàn)?08bp,編碼136個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)蛋白分子量15.3k Da;啟動(dòng)子polectinpro序列長(zhǎng)度為927bp,生物數(shù)據(jù)庫PLACE分析結(jié)果表明polectinpro含有低溫、干旱脅迫誘導(dǎo)和病程相關(guān)等抗逆元件。然后,構(gòu)建含有GFP融合蛋白的重組植物表達(dá)載體pCAMBIA1302-polectinpro-gfp,并進(jìn)行煙草遺傳轉(zhuǎn)化,結(jié)果證明該啟動(dòng)子能夠在低溫誘導(dǎo)下驅(qū)動(dòng)gfp基因表達(dá)。同時(shí)成功構(gòu)建了含有polectin2的重組植物表達(dá)載體pCAMBIA1301-polectin2并進(jìn)行了煙草遺傳轉(zhuǎn)化;對(duì)陽性轉(zhuǎn)化植株T1代和野生型種子進(jìn)行低溫脅迫實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明轉(zhuǎn)基因種子萌發(fā)率明顯高于野生型。綜上所述,推測(cè)polectin2基因具有耐低溫功能,且其啟動(dòng)子具有低溫誘導(dǎo)活性。上述結(jié)果為進(jìn)一步利用子實(shí)體凝集素polectin2基因提高食用菌的耐低溫等抗逆功能提供了理論依據(jù)和技術(shù)支持。
[Abstract]:Lectin plays an important role in the growth and development of edible fungi, resistance to diseases and insects, and anti-tumor, but the study on the anti-stress function of lectin gene of Pleurotus strigella is still weak. Therefore, the lectin polectin2 gene and its promoter sequence were cloned by PCR technique. Sequencing and bioinformatics showed that the gene contained no intron, and the complete open reading frame was 408 BP, encoding 136 amino acids. The molecular weight of predicted protein was 15.3kDa. the length of promoter polectinpro sequence was 927bp. the results of PLACE analysis in biological database showed that polectinpro contained anti-stress elements such as low temperature, drought stress induction and course of disease. Then, the recombinant plant expression vector pCAMBIA1302-polectinpro-gfpcontaining GFP fusion protein was constructed and transformed into tobacco. The results showed that the promoter could drive the expression of gfp gene under low temperature induction. At the same time, the recombinant plant expression vector pCAMBIA1301-polectin2 containing polectin2 was successfully constructed and genetic transformation of tobacco was carried out. The results showed that the germination rate of transgenic seeds was significantly higher than that of wild type. In conclusion, polectin2 gene has the function of low temperature tolerance and its promoter has low temperature induction activity. These results provide theoretical basis and technical support for the further use of the fruiting body lectin polectin2 gene to enhance the resistance to low temperature and other stresses of edible fungi.
【作者單位】： 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院食藥用菌教育部工程中心;龍泉市食藥用菌產(chǎn)業(yè)辦公室;
【基金】：公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201503137) 973項(xiàng)目(2014CB138305) 吉林省秸稈綜合利用技術(shù)創(chuàng)新平臺(tái)(吉高平合字[2014]B-1) 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)校內(nèi)啟動(dòng)基金(2015007) 吉林省科技發(fā)展項(xiàng)目(20140101148JC)~~
【分類號(hào)】：S646

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本文編號(hào)：1952980