Ⅰ型鴨甲型肝炎病毒VP0基因在桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中的表達(dá)
發(fā)布時(shí)間:2018-05-29 05:58
本文選題:Ⅰ型鴨甲型肝炎病毒 + VP基因 ; 參考:《河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年03期
【摘要】:為在昆蟲(chóng)細(xì)胞中表達(dá)Ⅰ型鴨甲型肝炎病毒(duck hepatitis A virus type-Ⅰ,DHAV-Ⅰ)SH株的結(jié)構(gòu)蛋白VP0,首先根據(jù)DHAV-Ⅰ SH株VP0基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物,RT-PCR方法擴(kuò)增出VP0基因,亞克隆至桿狀病毒轉(zhuǎn)移載體pFast Bac1,獲得重組質(zhì)粒p FB-VP0,將其轉(zhuǎn)化到DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞中,經(jīng)抗性和藍(lán)白斑篩選,獲得重組穿梭質(zhì)粒rBacmid-VP0,在脂質(zhì)體介導(dǎo)下轉(zhuǎn)染昆蟲(chóng)細(xì)胞Sf9,獲得重組桿狀病毒rBac-VP0。Western-blot結(jié)果顯示,表達(dá)的重組蛋白相對(duì)分子量約為29 k D,間接免疫熒光結(jié)果顯示重組蛋白能與鴨抗全病毒陽(yáng)性血清發(fā)生特異性反應(yīng)。研究結(jié)果表明,DHAV-Ⅰ SH株的結(jié)構(gòu)蛋白VP0在昆蟲(chóng)細(xì)胞中獲得了成功表達(dá),為VP0結(jié)構(gòu)蛋白的功能研究和基因工程疫苗的研制奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to express the structural protein VP0 of duck hepatitis A virus type- 鈪,
本文編號(hào):1949761
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