Ⅰ型鴨甲型肝炎病毒VP0基因在桿狀病毒表達系統(tǒng)中的表達
發(fā)布時間:2018-05-29 05:58
本文選題:Ⅰ型鴨甲型肝炎病毒 + VP基因。 參考:《河南農業(yè)大學學報》2017年03期
【摘要】:為在昆蟲細胞中表達Ⅰ型鴨甲型肝炎病毒(duck hepatitis A virus type-Ⅰ,DHAV-Ⅰ)SH株的結構蛋白VP0,首先根據DHAV-Ⅰ SH株VP0基因序列設計一對引物,RT-PCR方法擴增出VP0基因,亞克隆至桿狀病毒轉移載體pFast Bac1,獲得重組質粒p FB-VP0,將其轉化到DH10Bac感受態(tài)細胞中,經抗性和藍白斑篩選,獲得重組穿梭質粒rBacmid-VP0,在脂質體介導下轉染昆蟲細胞Sf9,獲得重組桿狀病毒rBac-VP0。Western-blot結果顯示,表達的重組蛋白相對分子量約為29 k D,間接免疫熒光結果顯示重組蛋白能與鴨抗全病毒陽性血清發(fā)生特異性反應。研究結果表明,DHAV-Ⅰ SH株的結構蛋白VP0在昆蟲細胞中獲得了成功表達,為VP0結構蛋白的功能研究和基因工程疫苗的研制奠定了基礎。
[Abstract]:In order to express the structural protein VP0 of duck hepatitis A virus type- 鈪,
本文編號:1949761
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