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轉(zhuǎn)Bt基因歐洲黑楊轉(zhuǎn)化TA29-Barnase基因的研究

發(fā)布時間:2018-05-27 04:45

  本文選題:轉(zhuǎn)Bt基因歐洲黑楊 + Barnase基因 ; 參考:《西北林學院學報》2017年01期


【摘要】:為了獲得雄性不育轉(zhuǎn)Bt基因歐洲黑楊,在以葉片為外植體建立轉(zhuǎn)Bt基因歐洲黑楊葉片組培再生體系的基礎上,利用農(nóng)桿菌介導葉盤法將TA29-Barnase基因轉(zhuǎn)化到轉(zhuǎn)Bt基因歐洲黑楊中。結(jié)果表明,轉(zhuǎn)Bt基因歐洲黑楊葉片不定芽分化最適培養(yǎng)基為:MS+0.5 mg·L~(-1) 6-BA+0.05mg·L~(-1) NAA+0.01mg·L~(-1) TDZ+30g·L~(-1)蔗糖+6g·L~(-1)瓊脂;不定芽生根最適培養(yǎng)基為:1/2MS+0.05mg·L~(-1) NAA+0.2mg·L~(-1) IBA+20g·L~(-1)蔗糖+6g·L~(-1)瓊脂;經(jīng)過在葉片不定芽誘導及生根誘導培養(yǎng)基添加除草劑PPT連續(xù)篩選,共獲得9株抗性植株。對抗性植株進行基因特異性PCR檢測,其中有5株呈陽性,轉(zhuǎn)化陽性率達55.6%。初步表明獲得了轉(zhuǎn)Barnase基因的轉(zhuǎn)Bt基因歐洲黑楊植株。
[Abstract]:In order to obtain transgenic black poplar with BT gene, TA29-Barnase gene was transformed into BT transgenic black poplar by Agrobacterium tumefaciens mediated leaf disc method on the basis of establishing the regeneration system of transgenic BT transgenic poplar leaves using leaves as explants. The results showed that the most suitable medium for adventitious bud differentiation of black poplar leaves with BT gene was MS: 0. 5 mg / L ~ (1) 6-BA 0.05mg / L ~ (1) NAA 0.01mg / L ~ (1) NAA 0.01mg / L ~ (1) TDZ ~ (30) g / L ~ (-1) sucrose 6 g / L ~ (-1) Agar, and the optimum medium for rooting of adventitious bud was: 1 / 1 / 2 MS / 0.05mg / L ~ (1) NAA 0.2mg / L ~ (1) IBA ~ (20 g / L ~ (-1) sucrose 6 g / L ~ (-1) Agar. After continuous selection of herbicide PPT on adventitious bud induction and rooting induction medium, 9 resistant plants were obtained. Five of the resistant plants were positive for gene specific PCR, and the positive rate of transformation was 55.6%. The results showed that the transgenic BT transgenic poplar plants with Barnase gene were obtained.
【作者單位】: 西北農(nóng)林科技大學林學院;
【基金】:國家林業(yè)局948項目“轉(zhuǎn)基因林木生物安全控制及早期評價技術引進”(2013-4-38)
【分類號】:S792.119

【參考文獻】

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【共引文獻】

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本文編號:1940506

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