煙草atp9基因RNAi表達(dá)載體的構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化
本文選題:煙草 + atp基因 ; 參考:《江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年01期
【摘要】:atp9基因是煙草的雄性不育相關(guān)基因。為研究atp9基因的功能及其在煙草雄性不育形成中的作用,根據(jù)atp9基因全長(zhǎng)序列,設(shè)計(jì)特異性引物,擴(kuò)增正、反義干擾片段,將長(zhǎng)度為239bp的atp9基因的正、反向干擾片段分別連接到linker片段的兩側(cè),最后插入到植物表達(dá)載體pCAMBIA1301中,成功地構(gòu)建了atp9基因的RNAi表達(dá)載體。利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將其轉(zhuǎn)化煙草保持系品種中煙90,結(jié)果證明atp9基因的RNAi表達(dá)載體已整合到中煙90基因組中。經(jīng)抗性篩選以及分子檢測(cè)最終獲得41株轉(zhuǎn)pCAMBIA1301-atp9-RNAi煙草植株,其中陽性煙草有20株,轉(zhuǎn)化率為48.8%。研究結(jié)果為下一步驗(yàn)證atp9基因的功能及其在煙草雄性不育形成中的作用奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Atp9 gene is a male sterility related gene in tobacco. In order to study the function of atp9 gene and its role in the formation of male sterility in tobacco, according to the full-length sequence of atp9 gene, specific primers were designed to amplify the sense and antisense interference fragments. The reverse interference fragments were connected to the two sides of the linker fragment respectively and inserted into the plant expression vector pCAMBIA1301. The RNAi expression vector of the atp9 gene was successfully constructed. Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of the tobacco maintainer line Zhongyan 90 showed that the RNAi expression vector of atp9 gene had been integrated into the genome of Zhongyan 90. After resistance screening and molecular analysis, 41 transgenic tobacco plants were obtained, 20 of which were positive, and the conversion rate was 48.8%. The results laid a foundation for further verification of the function of atp9 gene and its role in the formation of male sterility in tobacco.
【作者單位】: 江西農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院/作物生理生態(tài)與遺傳育種教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/江西省作物生理生態(tài)與遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;南昌職業(yè)學(xué)院;湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)生物安全科學(xué)技術(shù)學(xué)院/植物病蟲害生物學(xué)與防控湖南省重點(diǎn)試驗(yàn)室;江西農(nóng)業(yè)大學(xué)園林與藝術(shù)學(xué)院;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31260350,31301388) 江西省教育廳科技計(jì)劃項(xiàng)目(GJJ13275)~~
【分類號(hào)】:S572;Q943.2
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):1919123
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