光皮樺miR164及其靶基因NAC1在低氮脅迫中的表達分析
本文選題:光皮樺 + 低氮脅迫; 參考:《遺傳》2016年02期
【摘要】:氮是植物生長發(fā)育所必需的大量營養(yǎng)元素,植物缺氮后嚴重影響地上部分生物量的積累,因此,揭示植物如何抵抗或適應(yīng)低氮脅迫的分子機制具有重要意義。楊樹(Populus tremula×P.alba)NAC1(NAM,ATAF,CUC1)基因位于調(diào)控網(wǎng)絡(luò)上游,在低氮環(huán)境下調(diào)控下游關(guān)鍵基因的表達,進而調(diào)控根系生長以抵抗低氮脅迫。本文以光皮樺(Betula luminifera)G49-3無性系組培苗為材料,探討了miR164及其靶基因NAC1對低氮脅迫的響應(yīng)。通過RACE技術(shù)克隆了光皮樺NAC1基因(Gen Bank登錄號:KT900889),全長1497 bp,編碼358個氨基酸,N端具有高度保守的NAM結(jié)構(gòu)域;運用5′-RACE驗證了NAC1為miR164靶基因,切割位點在第10和11位堿基之間;采用q RT-PCR分析miR164與靶基因NAC1在低氮脅迫時的表達模式,發(fā)現(xiàn)miR164表達在根中的低氮處理前期(4 d)受到抑制,而后升高,而莖葉中表達模式與根不同;靶基因NAC1與miR164表達水平呈負相關(guān),且在恢復(fù)實驗組(重新添加全營養(yǎng)液)中,根中miR164表達上升,NAC1顯示出相應(yīng)的表達變化,暗示miR164及其靶基因NAC1可能在低氮脅迫響應(yīng)中發(fā)揮調(diào)控功能。本研究結(jié)果有助于揭示miR164對NAC1在低氮脅迫響應(yīng)中轉(zhuǎn)錄后水平的分子調(diào)控機制,為進一步研究miR164-NAC1在低氮脅迫響應(yīng)中的功能提供有價值的信息。
[Abstract]:Nitrogen is a large amount of nutrient elements necessary for plant growth and development, and plant nitrogen deficiency seriously affects the accumulation of aboveground biomass. Therefore, it is important to reveal how plants resist or adapt to the molecular mechanism of low nitrogen stress. The gene of poplar (Populus tremula x P.alba) NAC1 (NAM, ATAF, CUC1) is located in the upstream of the regulation network and in low nitrogen environment. The expression of the downstream key genes was regulated and the root growth was regulated to resist low nitrogen stress. In this paper, the response of miR164 and its target gene NAC1 to low nitrogen stress was investigated with the tissue culture of Betula luminifera G49-3 clone. The NAC1 gene of birch (Gen Bank login number: KT900889) was cloned by RACE technology, and the whole length was 1497 BP. With 358 amino acids, the N terminal has a highly conserved NAM domain, and 5 '-RACE is used to verify that NAC1 is a miR164 target gene and the cutting site is between tenth and eleventh bases. Q RT-PCR is used to analyze the expression pattern of miR164 and target gene NAC1 at low nitrogen stress, and it is found that miR164 expression is inhibited in the early stage of low nitrogen treatment (4 d) in the root and then increases. The expression pattern of the stem and leaf was different from the root, and the target gene NAC1 was negatively correlated with the expression level of miR164, and the expression of miR164 in the root of the experimental group was increased and the NAC1 showed a corresponding expression change, suggesting that miR164 and its target gene NAC1 may play a regulatory function in the response to low nitrogen stress. The results of this study are helpful. The molecular regulatory mechanism of the post transcriptional level of miR164 in the response of NAC1 to low nitrogen stress provides valuable information for further study of the function of miR164-NAC1 in the response to low nitrogen stress.
【作者單位】: 浙江農(nóng)林大學(xué)亞熱帶森林培育國家重點實驗室培育基地;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(編號:31300566) 浙江省竹木新品種選育重大科技專項(編號:2012C12908-8)資助~~
【分類號】:S792.15
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,本文編號:1917002
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