沙棘PEPCK基因的克隆及表達研究
本文選題:沙棘 + PEPCK基因。 參考:《西北植物學(xué)報》2017年10期
【摘要】:以沙棘為研究對象,通過RACE、基因克隆和定量PCR技術(shù),克隆并分析沙棘磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶基因(PEPCK)的序列信息,以及進化樹構(gòu)建和氨基酸的二級結(jié)構(gòu)分析,比較NaCl脅迫后PEPCK基因的表達變化,為揭示PEPCK基因在沙棘抗性方面的功能研究奠定基礎(chǔ)。結(jié)果顯示:(1)成功克隆了沙棘PEPCK基因,該基因開放閱讀框(ORF)為2 001bp,編碼666個氨基酸。(2)序列分析表明,沙棘PEPCK與蓖麻、黃頂菊、核桃等序列一致性高達85%以上;進化上沙棘PEPCK基因與蓖麻和狹葉羽扇豆較近,與煙草、擬南芥進化關(guān)系較遠。(3)在300mmol·L~(-1) NaCl鹽脅迫下,沙棘PEPCK基因表達在脅迫組中顯著上升,脅迫后7d時為未處理的2.5倍,15d時達到未處理的3.2倍。研究表明,沙棘PEPCK基因在沙棘適應(yīng)外源鹽脅迫的過程中可能發(fā)揮了重要作用。
[Abstract]:Hippophae rhamnoides (Hippophae rhamnoides) was used to clone and analyze the sequence information of phosphoenolpyruvate carboxykinase gene (PEPCK), the construction of phylogenetic tree and the secondary structure of amino acids by race, gene cloning and quantitative PCR. To study the function of PEPCK gene in Hippophae rhamnoides resistance by comparing the expression of PEPCK gene after NaCl stress. The results showed that PEPCK gene of Hippophae rhamnoides was cloned successfully. The ORF of the gene was 2 001 BP, encoding 666 amino acids. The sequence analysis showed that the sequence consistency of seabuckthorn PEPCK with ricin, yellow top and walnut was more than 85%. The PEPCK gene of Hippophae rhamnoides was close to ricin and narrow leaf lupin, but it was far related to tobacco and Arabidopsis thaliana. The expression of PEPCK gene in Hippophae rhamnoides increased significantly under the stress of NaCl salt stress. At 7 days after stress, it was 2.5 times as much as untreated and 3.2 times as much as untreated at 15 days. The results showed that the PEPCK gene of Hippophae rhamnoides may play an important role in the adaptation of Hippophae rhamnoides to exogenous salt stress.
【作者單位】: 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)與園藝學(xué)院;阿克蘇地區(qū)林業(yè)科學(xué)研究所;新疆師范大學(xué);
【基金】:自治區(qū)自然科學(xué)基金項目(2014211B037)
【分類號】:Q943.2;S793.6
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,本文編號:1914465
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