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實(shí)時(shí)熒光定量PCR研究蛋雞組織基因表達(dá)的內(nèi)參基因篩選

發(fā)布時(shí)間:2018-05-20 05:13

  本文選題:蛋雞 + 內(nèi)參基因 ; 參考:《中國(guó)畜牧獸醫(yī)》2017年08期


【摘要】:為篩選出蛋雞不同組織中穩(wěn)定表達(dá)的內(nèi)參基因,試驗(yàn)以120日齡的海蘭灰蛋雞(Gallus domesticus)為試驗(yàn)動(dòng)物,選取常見(jiàn)內(nèi)參基因RPS2、β-actin、GAPDH和HMBS作為候選基因,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)Ct值分析法對(duì)4個(gè)候選內(nèi)參基因的相對(duì)表達(dá)進(jìn)行測(cè)定,利用獨(dú)立評(píng)價(jià)軟件geNorm和NormFinder對(duì)蛋雞的4個(gè)候選內(nèi)參基因在不同組織(心臟、肝臟、肺臟、腎臟、腸、脛骨、胰臟和子宮)中的表達(dá)穩(wěn)定性進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果顯示,Ct值分析和geNorm程序分析均得出相似的結(jié)果,即RPS2基因始終占主導(dǎo)地位,穩(wěn)定性最強(qiáng),β-actin基因次之;NormFinder軟件分析顯示,HMBS基因穩(wěn)定性最好,最佳組合為HMBS和RPS2基因;當(dāng)分析不同組織中表達(dá)恒定的內(nèi)參基因時(shí),發(fā)現(xiàn)不同組織最穩(wěn)定的內(nèi)參基因也不完全相同。由此說(shuō)明,不同的組織器官和不同的分析方法得出的結(jié)論雖然不完全一致,但它們卻有著一定的潛在共性,發(fā)展趨勢(shì)有一定相似性,即RPS2和β-actin基因相對(duì)穩(wěn)定性更強(qiáng)。
[Abstract]:In order to screen the stable expression of internal reference genes in different tissues of laying hens, 120 days old Hailan gray laying hens (Gallus domesticusus) were used as experimental animals. The common internal reference genes RPS2, 尾 -actinine GAPDH and HMBS were selected as candidate genes. The relative expression of four candidate internal reference genes was determined by real-time fluorescence quantitative PCR assay. The four candidate internal reference genes were detected in different tissues (heart, liver, lung, kidney) by independent evaluation software geNorm and NormFinder. Expression stability was evaluated in intestine, tibia, pancreas and uterus. The results showed that the results of Ct value analysis and geNorm program analysis showed that the RPS2 gene was always dominant and the stability was the strongest, and the 尾 -actin gene followed by Norm Finder software analysis showed that the stability of HMBS gene was the best, and the best combination was HMBS and RPS2 gene. It was found that the most stable internal reference genes were not the same in different tissues when they were expressed in different tissues. It shows that although the conclusions of different tissues and organs and different analytical methods are not completely consistent, they have certain potential commonness, and the development trend has certain similarity, that is, the relative stability of RPS2 and 尾 -actin genes is stronger than that of 尾 -actin gene.
【作者單位】: 貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院;高原山地動(dòng)物遺傳育種與繁殖教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(31560642)
【分類號(hào)】:S831

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本文編號(hào):1913325

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