轉(zhuǎn)異質(zhì)型ACCase復(fù)合基因?qū)τ筒撕土康挠绊?/H1>
發(fā)布時(shí)間：2018-05-15 05:02
本文選題：ACCase + 農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法��； 參考：《分子植物育種》2017年03期
【摘要】：乙酰輔酶A羧化酶(ACCase)是脂肪酸生物合成的限速酶,在油料作物脂肪酸代謝和調(diào)控基因工程中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。本研究利用同尾酶反復(fù)酶切的方法,構(gòu)建了擬南芥Rubisco SSU小亞基轉(zhuǎn)運(yùn)肽與大腸桿菌異質(zhì)型ACCase各亞基基因的融合串聯(lián)種子特異表達(dá)載體,在根癌農(nóng)桿菌(Agrobacterium tumefaciens)介導(dǎo)的下胚軸轉(zhuǎn)化甘藍(lán)型油菜高油品種CY2,研究異質(zhì)型ACCase轉(zhuǎn)入油菜對(duì)含油量的影響。經(jīng)過抗生素篩選獲得11株轉(zhuǎn)化再生植株,PCR、Southern分子檢測證明四個(gè)目的基因已整合到T0代再生植株油菜基因組中。RT-PCR檢測其中4株,說明在轉(zhuǎn)基因株系中目標(biāo)基因在籽粒中特異表達(dá)。對(duì)T2代轉(zhuǎn)基因油菜含油量進(jìn)行測定,研究表明轉(zhuǎn)基因株系的含油量比對(duì)照提高了約5.7%。
[Abstract]:Acetyl-CoA carboxylase (ACCase) is a rate-limiting enzyme for fatty acid biosynthesis, which has important application value in oil crop fatty acid metabolism and gene engineering. In this study, we constructed the fusion series-specific expression vector of Arabidopsis thaliana Rubisco SSU small subunit transporter peptide and E. coli heterotype ACCase subunit gene by using the same tail enzyme digestion method. Hypocotyl transformation mediated by Agrobacterium tumefaciens (Agrobacterium tumefaciens) from Agrobacterium tumefaciens was used to study the effect of heterogenous ACCase on oil content of Brassica napus. 11 transformed regenerated plants were screened by antibiotics, and Southern analysis showed that the four target genes had been integrated into the genome of regenerated plants of T0 generation. RT-PCR was used to detect 4 of them, which indicated that the target genes were specifically expressed in the seeds of transgenic lines. The oil content of transgenic rapeseed in T2 generation was measured. The results showed that the oil content of transgenic lines was about 5.7% higher than that of control.
【作者單位】： 浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院病毒學(xué)與生物技術(shù)所浙江省植物有害生物防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室-省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31571700;31272114) 浙江省植物有害生物防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室-省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地(2010DS700124-KF1702;2010D700124-KF1609)共同資助
【分類號(hào)】：S565.4
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5 方敏;丁小霞;李培武;張兆威;陳小媚;姜俊;張文;甘冬生;;索氏抽提測定含油量的方法改良及其應(yīng)用[J];中國油料作物學(xué)報(bào);2012年02期
6 谷克仁;于小寶;;玉米含油量及脂肪酸的分析[J];糧油食品科技;2012年04期
7 江授南,程品珍,董雪姣,蔡督信;用比重法測定桕籽含油量快而準(zhǔn)[J];浙江林業(yè)科技;1981年03期
8 江援南,程品珍,董雪姣,蔡督信;比重法測定桕籽含油量[J];林業(yè)科技通訊;1982年10期
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2 王漢中;劉貴華;華瑋;王新發(fā);劉靜;詹高淼;;油菜含油量母體調(diào)控的分子基礎(chǔ)與遺傳改良[A];2010中國作物學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2010年
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本文編號(hào)：1891065
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本文選題：ACCase + 農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法��； 參考：《分子植物育種》2017年03期
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【基金】：國家自然科學(xué)基金(31571700;31272114) 浙江省植物有害生物防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室-省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地(2010DS700124-KF1702;2010D700124-KF1609)共同資助
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，本文編號(hào)：1891065
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