本文選題：類表皮生長因子域 + RNA干擾�。� 參考：《中國臨床藥理學(xué)雜志》2017年19期

【摘要】：目的用基因重組技術(shù)構(gòu)建LV3-人類EGFL7基因的小發(fā)卡RNA(LV3-h EGFL7-shRNA)慢病毒表達(dá)載體。方法設(shè)計(jì)靶向h EGFL7-shRNA序列,建立LV3-h EGFL7-shRNA,在慢病毒載體p GLV3/H1/GFP+Puro中放置h EGFL7-shRNA基因片段,DNA測序以及酶切的方式進(jìn)行檢測h EGFL7片段,轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞后對上清液進(jìn)行濃縮,最后在對病毒滴度進(jìn)行檢測。結(jié)果 EGFL7-shRNA核苷酸鏈有正確的插入順序,包裝慢病毒產(chǎn)生病毒懸液的滴度為2×108TU·m L~(-1)。結(jié)論 h EGFL7-shRNA慢病毒表達(dá)載體構(gòu)建成功,鑒定可滿足試驗(yàn)需求。
[Abstract]:Objective to construct the lentivirus expression vector of LV3-human EGFL7 RNA(LV3-h EGFL7-shRNA by gene recombination technique. Methods LV3-h EGFL7-shRNAs were designed, LV3-h EGFL7-shRNAs were established. H EGFL7-shRNA gene fragments were sequenced and digested to detect h EGFL7 fragments in lentivirus vector p GLV3/H1/GFP Puro. The supernatants were transfected into 293T cells and concentrated in the supernatant. Finally, the virus titer was detected. Results the EGFL7-shRNA nucleotide chain had the correct insertion sequence, and the titer of the virus suspension produced by the packaging lentivirus was 2 脳 108TU m / L ~ (-1). Conclusion the h EGFL7-shRNA lentivirus expression vector was successfully constructed and the identification can meet the needs of the test.
【作者單位】： �？谑腥嗣襻t(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;海南省農(nóng)墾總醫(yī)院神經(jīng)外科;
【基金】：海南省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(814375) 海南省衛(wèi)生廳基金資助項(xiàng)目(瓊衛(wèi)2010-31)
【分類號】：R741

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本文編號：1872062