本文選題：甘蔗 + ScPOD��； 參考：《作物學報》2017年04期

【摘要】：過氧化物酶(POD)廣泛存在于植物各種器官及其不同發(fā)育階段,在植物生長發(fā)育及應對逆境脅迫中起重要作用。本研究基于前期轉錄組數(shù)據(jù),從黑穗病菌侵染2 d的甘蔗抗黑穗病品種崖城05-179中分離到ScPOD02基因的cDNA(GenBank登錄號為KU593507)及基因組DNA(GenBank登錄號為KU593508)序列。其cDNA全長為1434 bp,ORF區(qū)為1047 bp,編碼348個氨基酸,而基因組DNA全長為1558 bp,含2個外顯子和1個內含子。系統(tǒng)發(fā)育樹顯示,ScPOD02與水稻Os Prx11(GenBank登錄號為gi|55700889)屬于同一個進化分支,推測ScPOD02屬于酸性胞外分泌/細胞壁類型的I.1型過氧化物酶家族。將該基因克隆到原核表達載體p ET 32a上,轉化大腸桿菌BL21,經(jīng)異丙基-β-d-硫代半乳糖苷誘導成功獲得了大小約60 k D的融合蛋白,且該重組菌在聚乙二醇脅迫下的長勢較對照快,表明其耐受干旱脅迫的能力更強。實時熒光定量PCR(q RT-PCR)分析表明,除ROC22和YZ03-103外,ScPOD02基因在甘蔗抗病品種(YZ03-258、YZ01-1413、YT96-86和LC05-136)中受黑穗病菌誘導上調表達,但在中感(GT02-467和FN39)和感病(FN40)品種中的基因表達量基本維持不變或略有降低;此外,ScPOD02積極應答水楊酸、脫落酸、聚乙二醇及氯化鈉的脅迫。通過農(nóng)桿菌介導法在本氏煙葉片上瞬時表達ScPOD02,結果顯示出較深的DAB染色,且過表達后本氏煙中的目標基因(ScPOD02)及過敏性反應(HR)標記基因(Nt HSR201和Nt HSR203)和乙烯合成依賴基因(Nt EFE26和Nt Accdeaminase)均上調表達。以上研究結果顯示,ScPOD02具有參與甘蔗免疫應答及抗旱和抗鹽害的潛在功能。
[Abstract]:Peroxidase (POD) is widely used in plant organs and different stages of development and plays an important role in plant growth and stress response. Based on the previous transcriptional data, this study is separated from the cDNA of the ScPOD02 gene in the 05-179 of the sugarcane resistant variety of smut resistant to smut fungus, which is infected by smut fungus 2 D (GenBank login number is KU593507). And the sequence of genomic DNA (GenBank logon number KU593508). Its full length of cDNA is 1434 BP, ORF region is 1047 BP, 348 amino acids are encoded, and the total length of genome DNA is 1558 BP, containing 2 exons and 1 introns. The phylogenetic tree shows that ScPOD02 and rice Os Prx11 is the same evolutionary branch. I.1 type peroxidase family of acidity exocrine / cell wall type. The gene was cloned into the prokaryotic expression vector p ET 32a and transformed into the Escherichia coli BL21. The fusion protein was successfully obtained by isopropyl - beta -d- Thioglucoside, and the size of the recombinant protein was about 60 K D, and the growth of the recombinant bacteria under polyethylene glycol was faster than that of the control. The real-time fluorescence quantitative PCR (Q RT-PCR) analysis showed that, except for ROC22 and YZ03-103, the ScPOD02 gene was up-regulated by the smut pathogen in the sugarcane resistant varieties (YZ03-258, YZ01-1413, YT96-86 and LC05-136), but the gene expression in the medium sense (GT02-467 and FN39) and the susceptible varieties was basic dimension. In addition, ScPOD02 actively respond to the stress of salicylic acid, abscisic acid, PEG and sodium chloride. ScPOD02 was expressed instantaneously on Benth tobacco by Agrobacterium mediated method, and the results showed a deeper DAB staining, and the target gene (ScPOD02) and anaphylactic reaction (HR) marker gene (Nt HSR201) in the tobacco after overexpression (Nt HSR201) And Nt HSR203) and ethylene synthesis dependent genes (Nt EFE26 and Nt Accdeaminase) were all up-regulated. The above results showed that ScPOD02 has the potential to participate in the immune response and drought resistance and salt resistance of sugarcane.

【作者單位】： 福建農(nóng)林大學/農(nóng)業(yè)部福建甘蔗生物學與遺傳育種重點實驗室/國家甘蔗產(chǎn)業(yè)技術研發(fā)中心;
【基金】：福建省杰出青年科學基金項目(2015J06006) 福建農(nóng)林大學杰出青年基金項目(xjq201630) 國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術體系建設專項(CARS-20)資助~~
【分類號】：S566.1

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本文編號：1863153