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山羊痘病毒P32抗原基因口服活載體DNA疫苗的構建

發(fā)布時間:2018-05-08 19:03

  本文選題:山羊痘病毒 + P基因; 參考:《中國獸醫(yī)科學》2017年03期


【摘要】:以減毒鼠傷寒沙門菌X 4550為載體,構建編碼缺失跨膜區(qū)和疏水區(qū)的山羊痘病毒P32基因的新型口服活載體D N A疫苗,通過體外傳代培養(yǎng)、大劑量接種試驗、免疫組織化學試驗、ELISA等對其安全性、穩(wěn)定性、免疫原性及免疫效果等進行綜合檢測評價。結果表明,X4550/pVAX1-P32在體外可穩(wěn)定傳代100代以上,小鼠口服1×10~(10)CF U X4550/pVAX1-P32后存活率為100%,接種后第10天仍能從脾中分離到X4550/pVAX1-P32,表明X4550/pVAX1-P32在體內(nèi)外均具有良好的安全性和穩(wěn)定性。免疫組織化學試驗結果顯示免疫小鼠脾細胞內(nèi)有黃褐色粗顆粒,表明X4550能將pVAX1-P32有效遞呈至免疫效應細胞并在其內(nèi)表達具有生物活性的P32蛋白。ELISA結果顯示,X4550/pVAX1-P32免疫組的抗體水平顯著高于pVAX1-P32免疫組(0.01P0.05),且X4550/pVAX1-P32免疫組能誘導持續(xù)時間更長的抗體水平(P0.01),表明活載體疫苗X4550/pVAX1-P32具有良好的免疫原性,能夠誘導機體產(chǎn)生持久的、高水平的免疫應答,這為羊痘新型疫苗的研究和應用奠定了基礎。
[Abstract]:Using attenuated Salmonella typhimurium X 4550 as vector, a novel oral live vector D N A vaccine encoding goat pox virus P32 gene with missing transmembrane and hydrophobic regions was constructed. The safety, stability, immunogenicity and immune effect were evaluated by Elisa. The results showed that X4550 / pVAX1-P32 could be passed through more than 100 passages in vitro, and the survival rate of mice was 100 after taking 1 脳 10~(10)CF U X4550/pVAX1-P32. X4550 / pVAX1-P32 could still be isolated from the spleen on the 10th day after inoculation, indicating that X4550/pVAX1-P32 had good safety and stability in vivo and in vitro. Immunohistochemical test showed that the spleen cells of immunized mice had yellow brown coarse granules. The results showed that X4550 could effectively present pVAX1-P32 to immune effector cells and express biologically active P32 protein. Elisa results showed that the antibody level of X4550 / pVAX1-P32 immunized group was significantly higher than that of pVAX1-P32 immunized group (0.01P0.05N), and X4550/pVAX1-P32 immunized group could induce longer duration. The antibody level of P0.01a indicated that the live vector vaccine X4550/pVAX1-P32 had good immunogenicity. It can induce persistent and high level immune response, which lays the foundation for the research and application of new vaccine of sheep pox.
【作者單位】: 新疆大學生命科學與技術學院;中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所家畜疫病病原生物學國家重點實驗室;
【基金】:新疆維吾爾自治區(qū)科技支疆項目(210-60879) 新疆維吾爾自治區(qū)高層次引進人才項目(1101/45051)
【分類號】:S852.4

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