本文選題：長春花 + 長春質(zhì)堿和文朵靈��； 參考：《生物技術(shù)通報》2017年06期

【摘要】：通過克隆長春花JAR1基因并在長春花葉片中瞬時過表達(dá),研究該基因?qū)ξ亩潇`及長春質(zhì)堿生物合成的調(diào)控。以總c DNA為模板,克隆JAR1基因,并構(gòu)建重組質(zhì)粒p BIGD-JAR1。經(jīng)農(nóng)桿菌介導(dǎo)瞬時轉(zhuǎn)化長春花葉片后,利用半定量RT-PCR與高效液相分析JAR1過表達(dá)對文朵靈及長春質(zhì)堿合成的影響。結(jié)果顯示,成功從長春花葉片中克隆1 700 bp左右的JAR1基因;瞬時轉(zhuǎn)化p BIGD-JAR1的長春花葉片中JAR1基因的轉(zhuǎn)錄水平高于空載體對照;JAR1的過表達(dá)誘導(dǎo)了合成途徑中關(guān)鍵酶基因Cr TDC、Cr G10H、Cr DL7H、Cr STR、Cr LAMT的表達(dá),以及文朵靈和長春質(zhì)堿的積累。結(jié)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析,JAR1基因過表達(dá)可能通過促進(jìn)茉莉酸(JA)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑來誘導(dǎo)關(guān)鍵代謝途徑酶基因的表達(dá)進(jìn)而促進(jìn)長春花中文朵靈和長春質(zhì)堿的積累。
[Abstract]:The regulation of JAR1 gene on the biosynthesis of Vindolin and vincristine was studied by cloning and transient overexpression in Changchun flower leaf tablets. Using total c DNA as template, the JAR1 gene was cloned and the recombinant plasmid pBIGD-JAR1 was constructed. After transient transformation of rosebush leaves mediated by Agrobacterium tumefaciens, the effects of JAR1 overexpression on the synthesis of vincristine and vincristine were analyzed by semi-quantitative RT-PCR and high performance liquid chromatography (HPLC). The results showed that 1 700 BP JAR1 gene was successfully cloned from the leaves of Catharanthus roseus. The transcriptional level of JAR1 gene in the leaves of Catharanthus roseus instant transformed with p BIGD-JAR1 was higher than that of the blank vector control JAR1. The overexpression of JAR1 gene induced the expression of the key enzyme gene Cr TDCN, Cr G10H, Cr DL7H, and the accumulation of vendolin and vincristine in the biosynthesis pathway. Combined with the experimental results, the overexpression of JAR1 gene may induce the expression of key metabolic pathway enzyme genes by promoting JAA signal transduction pathway, thus promoting the accumulation of VCR and vincristine.
【作者單位】： 大連工業(yè)大學(xué)生物工程學(xué)院;
【基金】：遼寧省教育廳基本科研業(yè)務(wù)項目(2016J048)
【分類號】：Q943.2;S567.239

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本文編號：1859233