利用多重PCR技術(shù)快速檢測五個(gè)轉(zhuǎn)基因大豆品系
本文選題:轉(zhuǎn)基因大豆 + 多重PCR; 參考:《大豆科學(xué)》2016年06期
【摘要】:轉(zhuǎn)基因大豆305423、MON89788、CV127、GTS40-3-2、356043作為商品化應(yīng)用最為廣泛的大豆品系,種植面積占世界轉(zhuǎn)基因大豆總種植面積的80%以上。根據(jù)大豆內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)基因Lectin和5種轉(zhuǎn)基因大豆品系的邊界序列設(shè)計(jì)特異性引物。通過驗(yàn)證引物的適用性、特異性和靈敏度,優(yōu)化多重PCR檢測體系中不同引物的用量及反應(yīng)退火溫度,建立了能同時(shí)擴(kuò)增大豆內(nèi)源基因Lectin和5個(gè)轉(zhuǎn)基因大豆品系的六重PCR檢測體系。結(jié)果表明:確定的大豆內(nèi)源基因和5個(gè)轉(zhuǎn)基因大豆品系的引物具有很好的特異性,引物之間無交叉擴(kuò)增和非特異性擴(kuò)增,多重PCR方法的檢測靈敏度達(dá)到0.1%。該方法可作為轉(zhuǎn)基因大豆及其產(chǎn)品成分檢測的輔助手段,快速檢測轉(zhuǎn)基因大豆及其產(chǎn)品中的相應(yīng)品系。
[Abstract]:Transgenic soybean (305423) MON89788 / CV127 GTS40-3-2 / 356043 is the most widely used soybean strain, and its planting area accounts for more than 80% of the total cultivated area of transgenic soybean in the world. Specific primers were designed according to the boundary sequence of the standard gene Lectin and 5 transgenic soybean strains. By verifying the applicability, specificity and sensitivity of the primers, the dosage of different primers and the reaction annealing temperature in the multiplex PCR detection system were optimized. A six-fold PCR detection system for simultaneous amplification of endogenous gene Lectin and 5 transgenic soybean lines was established. The results showed that the primers of the identified endogenous genes and 5 transgenic soybean lines had good specificity, and there was no cross amplification or nonspecific amplification between the primers. The sensitivity of the multiplex PCR method was 0.1%. This method can be used as an auxiliary means to detect the components of transgenic soybean and its products, and to quickly detect the corresponding strains in transgenic soybean and its products.
【作者單位】: 吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所;
【基金】:國家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項(xiàng)(2014ZX0801202B) 吉林省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新工程項(xiàng)目(2013)
【分類號】:S565.1
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本文編號:1852223
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