本文選題：轉(zhuǎn)基因水稻 + 旁側(cè)序列�。� 參考：《分子植物育種》2017年11期

【摘要】：利用hi TAIL-PCR方法研究了轉(zhuǎn)基因水稻Bar Kasalath-01中外源基因在基因組上插入位點(diǎn)的序列特征,獲得了外源基因T-DNA右邊界旁側(cè)序列511 bp,與水稻基因組數(shù)據(jù)庫比對(duì)發(fā)現(xiàn),外源基因插入位點(diǎn)位于水稻基因組第8號(hào)染色體的第3 326 720處。根據(jù)整合位點(diǎn)水稻基因組序列和外源基因T-DNA左邊界序列設(shè)計(jì)引物,擴(kuò)增得到了左旁側(cè)序列783 bp�；谧笥遗詡�(cè)序列,建立了轉(zhuǎn)基因水稻Bar Kasalath-01的事件特異性定性PCR檢測方法,擴(kuò)增片段分別為783 bp和411 bp。該方法特異性強(qiáng)、靈敏度高,能夠在Bar Kasalath-01基因組DNA含量為0.1%的模板中檢測出轉(zhuǎn)基因成份。依據(jù)旁側(cè)序列,還建立了快速鑒定轉(zhuǎn)基因后代植株基因型的3引物PCR檢測方法。這些方法的建立,實(shí)現(xiàn)了對(duì)轉(zhuǎn)基因水稻Bar Kasalath-01轉(zhuǎn)化事件的特異性檢測。
[Abstract]:Hi TAIL-PCR method was used to study the sequence characteristics of the insertion site of Bar Kasalath-01 gene in transgenic rice genome. The sequence of 511 BP on the right side of the T-DNA was obtained, and the sequence was compared with the rice genome database. The insertion site of exogenous gene was located at 3326 720 on chromosome 8 of rice genome. According to the sequence of rice genome and the left bound sequence of exogenous gene T-DNA, primers were designed, and the left flanking sequence of 783 BP was obtained. Based on the left and right flanking sequences, an event-specific qualitative PCR detection method for Bar Kasalath-01 of transgenic rice was established. The amplified fragments were 783bp and 411bprespectively. The method is specific and sensitive, and can be used to detect transgenic components in the template containing 0.1% genomic DNA of Bar Kasalath-01. According to the flanking sequence, a 3 primer PCR method was established for rapid genotyping of transgenic progenies. These methods were used to detect Bar Kasalath-01 transformation events in transgenic rice.
【作者單位】： 中國科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)過程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國科學(xué)院大學(xué);湖南省蠶桑科學(xué)研究所;
【基金】：轉(zhuǎn)基因生物新品種培育科技重大專項(xiàng)(2016ZX08001-003)資助
【分類號(hào)】：S511

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本文編號(hào)：1845044