發(fā)布時(shí)間：2018-05-02 16:00

  本文選題：萊茵衣藻 + 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法��； 參考：《西北大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》2017年01期

【摘要】：甘油3-磷酸�；D(zhuǎn)移酶基因(gpd1)可以調(diào)控植物脂質(zhì)代謝中關(guān)鍵酶甘油-3-磷酸脫氫酶(GPDH)的活性,能促進(jìn)植物脂質(zhì)合成。本研究以萊茵衣藻FACHB-479為受體,通過(guò)克隆酵母gpd1基因,構(gòu)建萊茵衣藻的農(nóng)桿菌雙元表達(dá)載體pRI-Ble-GPD1,首次以農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將攜帶在農(nóng)桿菌LBA4404的gpd1基因轉(zhuǎn)移到FACHB-479基因組。在含有10μg/m L博萊霉素的TAP平板篩選得到抗性藻體細(xì)胞。經(jīng)過(guò)分子生物學(xué)PCR及RTPCR鑒定,獲得轉(zhuǎn)基因藻FACHB-GPD。尼羅紅染色法鑒定分析FACHB-GPD細(xì)胞中油脂含量增高1.3~1.52倍。該研究表明農(nóng)桿菌介導(dǎo)外源gpd1基因在萊茵衣藻FACHB-479基因組的過(guò)表達(dá)能增加脂肪酸含量,從而提高其產(chǎn)油能力。
[Abstract]:Glycerol 3-phosphate transferase gene (gpd1) can regulate the activity of glycerol-3-phosphate dehydrogenase (GPDH), a key enzyme in plant lipid metabolism, and promote plant lipid synthesis. In this study, the bivariate expression vector pRI-Ble-GPD1 was constructed by cloning the yeast gpd1 gene from Chlamydomonas rhinella FACHB-479, and the gpd1 gene carrying Agrobacterium LBA4404 was transferred to the FACHB-479 genome by Agrobacterium-mediated method for the first time. TAP plate containing 10 渭 g / mL bleomycin was used to screen resistant algal somatic cells. The transgenic algae FACHB-GPDwas obtained by molecular biological PCR and RTPCR identification. The oil content in FACHB-GPD cells was 1.52 times higher than that in FACHB-GPD cells by Nile red staining. This study indicated that the overexpression of exogenous gpd1 gene in FACHB-479 genome of Chlamydomonas rhinorrhoeae could increase the fatty acid content and increase its oil production ability by Agrobacterium tumefaciens (Agrobacterium tumefaciens).
【作者單位】： 西部資源與現(xiàn)代生物技術(shù)省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/陜西省生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/西北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31270411,31572665) 陜西省科技廳社會(huì)發(fā)展攻關(guān)計(jì)劃基金資助項(xiàng)目(2012K12-01-02) 陜西省教育廳專項(xiàng)基金資助項(xiàng)目(12JK0827)
【分類號(hào)】：Q943.2

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本文編號(hào)：1834561