本文選題：水產(chǎn)動(dòng)物源細(xì)菌 + 磺胺類耐藥基因　； 參考：《湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》2017年01期

【摘要】：根據(jù)Gen Bank中細(xì)菌磺胺類耐藥基因Sul1、Sul2和Sul3的保守序列設(shè)計(jì)3對(duì)特異性引物及相應(yīng)Taq Man探針,以重組質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品為模板對(duì)反應(yīng)條件進(jìn)行優(yōu)化,建立一種可同時(shí)檢測(cè)上述3種耐藥基因的三重?zé)晒舛縋CR方法,并對(duì)該方法進(jìn)行敏感性、特異性、重復(fù)性及臨床菌株檢測(cè)試驗(yàn)。結(jié)果表明:該方法定量范圍為1×10~1~1×10~8拷貝/反應(yīng)時(shí),其標(biāo)準(zhǔn)曲線呈良好的線性關(guān)系;該方法靈敏度高(3個(gè)基因的最低質(zhì)粒檢測(cè)限均可達(dá)到10拷貝/反應(yīng))、特異性強(qiáng)(與其他病原菌及病毒無(wú)交叉反應(yīng))、重復(fù)性好(變異系數(shù)均小于2%);對(duì)臨床菌株的檢測(cè)結(jié)果與藥敏試驗(yàn)結(jié)果的符合率達(dá)94.2%,且整個(gè)檢測(cè)過(guò)程可在2 h內(nèi)完成。所建立的可同時(shí)檢測(cè)Sul1、Sul2和Sul3基因的三重?zé)晒舛縋CR方法可用于臨床檢測(cè)細(xì)菌的磺胺類耐藥基因。
[Abstract]:Three pairs of specific primers and corresponding Taq Man probes were designed according to the conserved sequences of sulfamethylamine Sulfur2 and Sul3 in Gen Bank, and the reaction conditions were optimized by using the standard plasmid as template. A triple fluorescence quantitative PCR method was developed for the simultaneous detection of the three drug resistant genes, and the sensitivity, specificity, reproducibility and clinical strains were tested. The results showed that the standard curve showed a good linear relationship when the quantitative range of the method was 1 脳 10 ~ (-1) ~ 1 脳 10 ~ (8) copy / reaction. This method has high sensitivity (the lowest plasmid detection limit of three genes can be up to 10 copies / reaction), strong specificity (no cross reaction with other pathogens and viruses, good reproducibility (coefficient of variation less than 2%), and detection of clinical strains The coincidence rate between the test results and the drug sensitivity test results was 94.2%, and the whole detection process could be completed within 2 hours. The triplex fluorescence quantitative PCR method for simultaneous detection of Sul1-Sul2 and Sul3 genes can be used in clinical detection of sulfanilamide-resistant genes in bacteria.
【作者單位】： 廣西水產(chǎn)科學(xué)研究院;
【基金】：廣西水產(chǎn)畜牧科技項(xiàng)目(桂漁牧科201528044) 廣西科技攻關(guān)項(xiàng)目(桂科攻1355010 3)
【分類號(hào)】：S941.4

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 路浩;王興龍;李曉艷;雷連成;魯景艷;馮新;萬(wàn)家余;李忠義;楊冬;;基因芯片檢測(cè)細(xì)菌耐藥基因[J];中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào);2008年02期

2 王利勤;王晶鈺;董睿;張三東;江躍德;陳占莉;李志良;;雞源致病性大腸埃希菌中氨基糖苷類抗生素耐藥基因的檢測(cè)[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2012年07期

3 李英霞;郭大偉;李洪恩;姚杰;蘇利婭;王麗平;;紅霉素與四環(huán)素耐藥基因在豬鏈球菌臨床分離株中的檢測(cè)[J];畜牧與獸醫(yī);2009年10期

4 芮萍;馬增軍;陳翠珍;段玲欣;郭玉芳;房海;;豬源鏈球菌對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類主要耐藥基因的檢測(cè)[J];中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào);2011年06期

5 王冠玉;譚艾娟;呂世明;張劍勇;吳宗芬;;貴州豬 雞源大腸桿菌質(zhì)粒介導(dǎo)喹諾酮類耐藥基因調(diào)查[J];中國(guó)獸醫(yī)雜志;2014年04期

6 金鑫;張文廣;張燕軍;蘇蕊;王瑞軍;李金泉;;飼喂不同抗生素對(duì)肉牛廢棄糞便中四環(huán)素耐藥基因數(shù)量及持久性的影響[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2012年10期

7 王麗平,陸承平;動(dòng)物源性鏈球菌紅霉素耐藥基因的分布[J];畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào);2005年09期

8 柳林;張文娟;田召芳;;雞致病性大腸桿菌的分離鑒定及耐藥基因的檢測(cè)[J];中國(guó)動(dòng)物檢疫;2010年07期

9 李楊;鞠玉琳;李佳佳;;中藥復(fù)方制劑連黃對(duì)沙門氏菌耐藥基因aph(3′)-Ⅱa mRNA表達(dá)水平的影響[J];湖北農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年08期

10 金彪;伍成奇;唐攀;邱淵皓;劉萬(wàn)華;武寧;王晶鈺;;肉雞源致病性大腸埃希菌中β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥基因的檢測(cè)[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2013年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 孔繁德;陸承平;彭海濱;徐淑菲;陳瓊;;多重PCR技術(shù)檢測(cè)沙門菌兩種四環(huán)素耐藥基因[A];第二屆全國(guó)人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

2 石燕華;李昌崇;;肺炎鏈球菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類及大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥基因的研究進(jìn)展[A];第六屆江浙滬兒科學(xué)術(shù)會(huì)議暨兒科學(xué)基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展學(xué)術(shù)班論文匯編[C];2009年

3 金先慶;李映良;向麗;李長(zhǎng)春;羅慶;梁紹燕;宿玉璽;鄭改煥;;五種耐藥基因在15種332例兒童惡性腫瘤組織中表達(dá)的特點(diǎn)及臨床應(yīng)用[A];中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)第七屆全國(guó)小兒腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

4 莫非;;耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐藥基因及消毒劑耐藥相關(guān)基因的檢測(cè)[A];第五次全國(guó)中青年檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

5 王晶;韓麗霞;;耐亞胺培南銅綠假單胞菌的耐藥基因研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議資料匯編[C];2008年

6 王鳳玲;馮秀河;劉靜;張竟宇;;耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐藥基因及致病毒素基因的研究[A];第五屆全國(guó)中醫(yī)藥免疫學(xué)術(shù)研討會(huì)——暨環(huán)境·免疫與腫瘤防治綜合交叉會(huì)議論文匯編[C];2009年

7 呂火祥;麇祖煌;胡慶豐;沈蓓瓊;;泛耐藥產(chǎn)酸克雷伯菌的耐藥基因研究[A];2007年浙江省醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2007年

8 雷永良;王曉光;陳秀英;;麗水市結(jié)核分枝桿菌分離株5種耐藥基因突變特點(diǎn)分析[A];2011年浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)病毒學(xué)分會(huì)、醫(yī)學(xué)微生物與免疫學(xué)分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年

9 李晨;;耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐藥性及耐藥基因研究[A];中國(guó)醫(yī)院協(xié)會(huì)第十四屆全國(guó)醫(yī)院感染管理學(xué)術(shù)年會(huì)資料匯編[C];2007年

10 胡紅兵;熊寶華;夏維;王軍;康世秀;;新生兒甲氧西林耐藥凝固酶陰性葡萄球菌血液感染分離株耐藥基因研究[A];第六屆全國(guó)抗菌藥物臨床藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 記者 徐志勇;深圳發(fā)現(xiàn)兩個(gè)新型耐藥基因[N];廣東科技報(bào);2007年

2 王其玲 李水根;抗生素新耐藥基因被捕獲[N];健康報(bào);2003年

3 段軍軍　熊學(xué)莉;“探訪”我國(guó)第一條腫瘤耐藥基因[N];解放軍報(bào);2002年

4 本報(bào)記者 齊芳;人體腸道菌群耐藥基因研究獲新突破[N];光明日?qǐng)?bào);2013年

5 記者 鮑文娟邋通訊員 帥菲斐;深一醫(yī)生全球率先發(fā)現(xiàn)兩新耐藥基因[N];廣州日?qǐng)?bào);2007年

6 易運(yùn)文;深圳醫(yī)生全球首次發(fā)現(xiàn)耐藥基因[N];光明日?qǐng)?bào);2007年

7 陳英云 喬蕤琳;我省專家首次確立控制耐藥基因表達(dá)研究思路[N];黑龍江經(jīng)濟(jì)報(bào);2010年

8 記者 陳楓;超級(jí)細(xì)菌蔓延?實(shí)為“耐藥基因”![N];南方日?qǐng)?bào);2010年

9 記者 郭靜 通訊員 郝黎 張丹娜;肺癌耐藥基因找到了[N];廣東科技報(bào);2010年

10 張?zhí)锟?濫用抗生素讓環(huán)境幾度呻吟[N];中國(guó)綠色時(shí)報(bào);2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前9條

1 李德喜;惡唑烷酮類耐藥基因cfr和optrA在豬源MRSA和CoNS中流行及傳播機(jī)制的研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

2 熊文廣;抗生素耐藥基因在動(dòng)物腸道中的排布和在微環(huán)境中的消減規(guī)律[D];華南農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

3 魯曦;低劑量抗生素刺激條件下耐藥基因水平傳播的機(jī)制研究[D];華南理工大學(xué);2012年

4 魯玉俠;食源微生物耐藥基因水平傳播抑制研究[D];華南理工大學(xué);2010年

5 王晶;慢性阻塞性肺疾病急性加重多中心病原及耐藥基因分子流行病學(xué)調(diào)查[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2014年

6 毛錦龍;Ⅱ-Ⅲ級(jí)星型細(xì)胞瘤體外誘導(dǎo)耐藥細(xì)胞—干細(xì)胞基因及耐藥基因研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2010年

7 葉蕾;廣州市水產(chǎn)養(yǎng)殖品中耐藥共生菌分布及耐藥基因傳播機(jī)制的研究[D];華南理工大學(xué);2012年

8 瞿婷婷;多重耐藥腸球菌耐藥基因篩選及傳播機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2007年

9 佟盼盼;雞糞便菌耐藥基因及其產(chǎn)ESBLs大腸桿菌耐藥性的研究[D];吉林大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 何紅美;2014年石家莊地區(qū)圍產(chǎn)期婦女B族鏈球菌的耐藥性及其耐藥基因的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 王佳Z，

本文編號(hào)：1817759