CD147基因沉默抑制三陰性乳腺癌細(xì)胞增殖的作用機(jī)制
本文選題:三陰性乳腺癌 + CD。 參考:《上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2017年03期
【摘要】:目的·探討CD147基因沉默對(duì)三陰性乳腺癌細(xì)胞的增殖抑制作用及機(jī)制。方法·體外培養(yǎng)人正常乳腺上皮細(xì)胞HMEC及3株三陰性乳腺癌細(xì)胞株(MDA-MB-231、HCC70和T4-2),采用real-time PCR和Western blotting分別檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)CD147 m RNA和蛋白表達(dá)。設(shè)計(jì)針對(duì)人CD147基因編碼區(qū)的si RNA序列,構(gòu)建重組慢病毒Lv-sh RNA-CD147并感染乳腺癌細(xì)胞,設(shè)立陰性對(duì)照(Lv-NC感染組)和不感染細(xì)胞對(duì)照(細(xì)胞對(duì)照組)。采用real-time PCR和Western blotting檢測(cè)CD147基因沉默效果;采用MTT法和Transwell試驗(yàn)分別檢測(cè)細(xì)胞增殖活性和細(xì)胞遷移能力。收集病毒感染后72 h的HCC70細(xì)胞,采用Western blotting檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)增殖、遷移、凋亡相關(guān)蛋白(β-catenin、MMP2、MMP9和Bax)的表達(dá)。結(jié)果·3株乳腺癌細(xì)胞中CD147 m RNA及蛋白的表達(dá)均顯著高于HMEC細(xì)胞(P0.01)。與Lv-NC感染組和細(xì)胞對(duì)照組比較,Lv-sh RNA-CD147感染組CD147 m RNA和蛋白表達(dá)下調(diào),細(xì)胞增殖活性降低,細(xì)胞遷移能力減弱,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。病毒感染后72 h,與相應(yīng)的Lv-NC感染組和細(xì)胞對(duì)照組比較,Lv-sh RNA-CD147感染組HCC70細(xì)胞內(nèi)β-catenin、MMP2、MMP9表達(dá)降低,而Bax表達(dá)增高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論·CD147基因沉默可以抑制三陰性乳腺癌細(xì)胞的增殖和遷移。
[Abstract]:Objective to investigate the inhibitory effect and mechanism of CD147 gene silencing on the proliferation of three negative breast cancer cells. Methods Human normal breast epithelial cells (HMEC) and three three-negative breast cancer cell lines (MDA-MB-231) HCC70 and T4-2 were cultured in vitro. The expression of CD147 m RNA and protein were detected by real-time PCR and Western blotting, respectively. Si RNA sequence targeting the coding region of human CD147 gene was designed. The recombinant lentivirus Lv-sh RNA-CD147 was constructed and infected with breast cancer cells. The negative control group (Lv-NC infection group) and the non-infected cell control group (cell control group) were established. The silencing effect of CD147 gene was detected by real-time PCR and Western blotting, and the cell proliferation activity and cell migration ability were detected by MTT assay and Transwell test, respectively. HCC70 cells were collected at 72 h after infection. The proliferation, migration and expression of apoptosis-related proteins (尾 -cateninin MMP2, MMP9 and Bax) were detected by Western blotting. Results the expression of CD147 m RNA and protein in three breast cancer cells was significantly higher than that in HMEC cells. Compared with Lv-NC infection group and cell control group, the expression of CD147 m RNA and protein in Lv-sh RNA-CD147 infection group was down-regulated, cell proliferation activity was decreased, cell migration ability was weakened, and the difference was statistically significant (P 0.01). 72 h after infection, the expression of 尾 -cateninine MMP2mMP9 in HCC70 cells was decreased and the expression of Bax was increased in Lv-sh RNA-CD147 infected HCC70 cells, compared with the corresponding Lv-NC infection group and the cell control group. The difference was statistically significant (P 0.01). Conclusion CD147 gene silencing can inhibit the proliferation and migration of three negative breast cancer cells.
【作者單位】: 上海市黃浦區(qū)中心醫(yī)院乳腺外科;同濟(jì)大學(xué)醫(yī)學(xué)院;同濟(jì)大學(xué)附屬第一婦幼保健院乳腺外科;上海市黃浦區(qū)中心醫(yī)院病理科;
【基金】:上海市衛(wèi)生與計(jì)劃生育委員會(huì)科研課題(201540259)~~
【分類號(hào)】:R737.9
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,本文編號(hào):1810251
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