本文選題：地黃 + RgDXR基因��； 參考：《植物生理學(xué)報(bào)》2017年04期

【摘要】：本研究采用RT-PCR法對(duì)地黃DXR基因進(jìn)行克隆,并用生物信息學(xué)方法分析其功能結(jié)構(gòu)域、系統(tǒng)進(jìn)化等;將地黃DXR基因克隆到原核表達(dá)載體p ET-32a上,使用大腸桿菌BL21菌株進(jìn)行Rg DXR蛋白的原核表達(dá)及純化,實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法分析Rg DXR在不同組織、不同內(nèi)生菌誘導(dǎo)下的表達(dá)特性。獲得的Rg DXR基因c DNA全長(zhǎng)為1 425 bp,編碼474個(gè)氨基酸。生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)Rg DXR基因編碼的蛋白質(zhì)具有典型的DXR功能結(jié)構(gòu)域,屬于植物DXR基因家族。系統(tǒng)進(jìn)化樹分析表明,地黃Rg DXR與芝麻親緣關(guān)系最近。熒光定量PCR結(jié)果顯示,栽培品種‘北京3號(hào)’根中Rg DXR表達(dá)量最高。內(nèi)生真菌誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)表明,Rg DXR基因的轉(zhuǎn)錄水平與梓醇等環(huán)烯醚萜類物質(zhì)的含量成正相關(guān)。本研究克隆所得的地黃Rg DXR基因?qū)儆贒XR基因家族,推測(cè)其可能與地黃中環(huán)烯醚萜類物質(zhì)的生物合成有關(guān)。
[Abstract]:In this study, the DXR gene of Rehmannia glutinosa was cloned by RT-PCR, its functional domain and phylogeny were analyzed by bioinformatics, and the DXR gene of Rehmannia glutinosa was cloned into the prokaryotic expression vector p ET-32a. E. coli BL21 strain was used for prokaryotic expression and purification of rg DXR protein. The expression characteristics of rg DXR in different tissues and endophytic bacteria were analyzed by real-time fluorescence quantitative PCR. The total length of c DNA of rg DXR gene was 1 425 BP, encoding 474 amino acids. Bioinformatics analysis showed that the protein encoded by Rg DXR gene had a typical DXR functional domain and belonged to the DXR gene family of plants. Phylogenetic tree analysis showed that Rg DXR of Rehmannia glutinosa had the closest relationship with sesame seeds. The results of fluorescence quantitative PCR showed that the rg DXR expression was the highest in the roots of the cultivar 'Beijing 3'. The induction of endophytic fungi showed that the transcription level of Rg DXR gene was positively correlated with the content of iridoterpenes such as catalpol. In this study, the Rg DXR gene of Rehmannia glutinosa belongs to the DXR gene family, which may be related to the biosynthesis of the terpenoids from Rehmannia glutinosa.
【作者單位】： 河南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院呼吸疾病診療與新藥研發(fā)河南省協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81603232) 國(guó)家“十二五”科技支撐計(jì)劃(2011BAl06802) 河南中醫(yī)學(xué)院博士科研基金(BSJJ2011-07)~~
【分類號(hào)】：Q943.2;S567.234

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本文編號(hào)：1802250