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心肌特異性Creg基因條件敲除小鼠的建立及表型分析

發(fā)布時(shí)間:2018-04-21 05:12

  本文選題:Creg + 條件敲除; 參考:《現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展》2016年36期


【摘要】:目的:建立心肌特異性Creg基因敲除小鼠并初步分析其表型。方法:利用訂購(gòu)的Creg兩端插入lox P位點(diǎn)(Cregflox/flox)的小鼠與肌型肌酸激酶特異性啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的Cre重組酶轉(zhuǎn)基因(Ckmm-cre)小鼠交配,獲得Cregflox/+/Ckmm-cre小鼠。再利用Cregflox/+/Ckmm-cre小鼠互相交配,獲得基因型為Cregflox/flox/Ckmm-cre的心肌特異性Creg基因條件敲除(Creg conditional knockout,Creg c KO)小鼠。用PCR法進(jìn)行基因型鑒定。用定量PCR及Western Blot檢測(cè)心肌組織中Creg表達(dá)水平。HE染色觀察敲除小鼠與同窩野生型對(duì)照小鼠心臟大小及形態(tài)。檢測(cè)兩組小鼠心電圖。用小動(dòng)物超聲評(píng)價(jià)兩組小鼠左心室收縮功能。結(jié)果:1經(jīng)基因型鑒定,成功獲得Creg c KO小鼠。2與野生型對(duì)照相比,Creg c KO小鼠心臟中CREG在轉(zhuǎn)錄及翻譯水平表達(dá)降低90%以上。3與野生型對(duì)照相比,Cre c KO小鼠的心臟大小、形態(tài)、心電圖及左心室射血分?jǐn)?shù)均無(wú)顯著差別。結(jié)論:成功建立心肌特異性CREG基因條件敲除小鼠,為進(jìn)一步研究Creg在心臟疾病中的作用和機(jī)制提供了有力的工具。
[Abstract]:Objective : To establish the myocardial specificity Creg gene knockout mice and to analyze the phenotype of mice . Methods : To obtain Cregflox / + / Ckmm - cre mice by mating with Cregflox / + / Ckmm - cre mice .

【作者單位】: 沈陽(yáng)軍區(qū)總醫(yī)院心血管病研究所心內(nèi)科;南京大學(xué)模式動(dòng)物研究中心;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目(81130072);國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81570767,81570265)
【分類號(hào)】:R54

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本文編號(hào):1781059

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