本文選題：加工番茄 + SlAGOA��； 參考：《生物技術(shù)》2017年06期

【摘要】：[目的]構(gòu)建加工番茄SlAGO4A基因過(guò)表達(dá)及干擾載體,獲得相應(yīng)的轉(zhuǎn)基因番茄植株。[方法]利用PCR技術(shù)從番茄c DNA文庫(kù)中獲得2 727 bp的加工番茄SlAGO4A基因。構(gòu)建SlAGO4A基因的過(guò)量表達(dá)載體35S:SlAGO4A。以獲得的SlAGO4A基因?yàn)槟０?獲得了SlAGO4A PIWI的220 bp的片段,構(gòu)建SlAGO4A基因的RNAi干擾載體RNAi-PIWI,通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化,獲得SlAGO4A過(guò)表達(dá)及干擾轉(zhuǎn)基因番茄陽(yáng)性植株,并利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(QRTPCR)技術(shù)檢測(cè)過(guò)表達(dá)番茄陽(yáng)性植株中的SlAGO4A基因的表達(dá)水平。[結(jié)果]經(jīng)PCR鑒定獲得5株獨(dú)立轉(zhuǎn)化的里格87-5干擾轉(zhuǎn)基因加工番茄株系,獲得6株獨(dú)立轉(zhuǎn)化的里格87-5過(guò)量表達(dá)轉(zhuǎn)基因加工番茄株系,其6株SlAGO4A基因過(guò)表達(dá)的陽(yáng)性植株的表達(dá)量均有不同程度的上調(diào)。[結(jié)論]為闡明SlAGO4A基因在加工番茄抗病毒信號(hào)通路中的功能奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:[objective] to construct the overexpression and interference vector of SlAGO4A gene of processed tomato and obtain the transgenic tomato plants. [methods] 2 727 BP SlAGO4A gene was obtained from tomato c DNA library by PCR. The overexpression vector of SlAGO4A gene 35 S: SlAGO4A was constructed. The 220bp fragment of SlAGO4A PIWI was obtained by using the obtained SlAGO4A gene as template. The RNAi interference vector RNAi-PIWI of SlAGO4A gene was constructed, and the SlAGO4A overexpression and interfering transgenic tomato positive plants were obtained by Agrobacterium tumefaciens mediated genetic transformation. The expression level of SlAGO4A gene in tomato positive plants was detected by real-time fluorescence quantitative PCR PCR. [results] five independent transformed riger 87-5 transgenic tomato lines were identified by PCR, and 6 independent transformed riger 87-5 transgenic tomato lines were obtained. All of the 6 SlAGO4A gene overexpression positive plants were up-regulated in varying degrees. [conclusion] this study lays a foundation for elucidating the function of SlAGO4A gene in processing tomato antiviral signaling pathway.
【作者單位】： 石河子大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院石河子大學(xué)農(nóng)業(yè)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(“番茄OPA3-like基因的功能研究”,No.31460466)
【分類(lèi)號(hào)】：Q943.2

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本文編號(hào)：1777818