本文選題：牛傳染性鼻氣管炎 + gE、gB基因��； 參考：《中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)》2017年07期

【摘要】：為建立牛傳染性鼻氣管炎病毒(IBRV)的雙重?zé)晒舛縋CR檢測方法,本研究根據(jù)Gen Bank中登錄的IBRV g E和g B基因序列,設(shè)計(jì)2對特異性引物及Taq Man探針。結(jié)果顯示,以含有g(shù)B、gE基因的重組質(zhì)粒為模板繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,其相關(guān)系數(shù)(R~2)均為0.999,有良好的線性關(guān)系。該方法僅對IBRV檢測為陽性,而對牛支原體、牛副流感病毒3型、牛病毒性腹瀉病毒、巴氏桿菌、牛、羊布魯氏菌檢測結(jié)果均為陰性,表明其特異性強(qiáng)。該方法的敏感度約為2拷貝/μL,重復(fù)性試驗(yàn)表明該方法的組內(nèi)和組間變異系數(shù)均小于2%。根據(jù)被OIE采納的作為國際貿(mào)易規(guī)定的檢測該病毒的熒光定量PCR方法與本實(shí)驗(yàn)建立的方法分別對30份牛肺樣品進(jìn)行檢測,符合率可達(dá)81.8%。研究表明所建立的熒光定量PCR檢測方法具有快速、敏感、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn),可以用于IBRV的檢測。
[Abstract]:In order to establish a double fluorescent quantitative PCR method for detection of bovine infectious rhinotracheitis virus (IBRV), two pairs of specific primers and Taq Man probes were designed according to the sequence of IBRV g E and g B genes registered in Gen Bank. The results showed that the standard curve of the recombinant plasmids containing gBngE gene was taken as template, the correlation coefficient was 0.999, and there was a good linear relationship. This method was only positive for IBRV, but negative for Mycoplasma Bovis, Bovine parainfluenza virus type 3, Bovine viral diarrhea virus, Pasteurella, Bovine and Sheep Brucella. The sensitivity of the method was about 2 copies / 渭 L, and the repeatability test showed that the coefficient of variation within and between groups of the method was less than 2 copies / 渭 L. According to the fluorescence quantitative PCR method adopted by OIE as an international trade regulation and the method established in this experiment, 30 bovine lung samples were detected respectively. The coincidence rate was 81.8%. The results show that the established fluorescence quantitative PCR method has the advantages of fast, sensitive and accurate, and can be used for the detection of IBRV.
【作者單位】： 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院;農(nóng)業(yè)部動(dòng)物疾病臨床診療技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2015BA107B02)子課題(2015BA107B02-07)
【分類號】：S852.653

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本文編號：1776496