卷枝毛霉△6-脂肪酸脫飽和酶基因的敲除及功能研究
本文選題:γ-亞麻酸 + 卷枝毛霉; 參考:《食品與生物技術學報》2017年06期
【摘要】:γ-亞麻酸(γ-Linolenic acid,GLA)是人體所必需且具有多種生理功能的一種重要多不飽和脂肪酸。研究表明,卷枝毛霉等GLA生產(chǎn)菌株中△6-脂肪酸脫飽和酶(△6-Fatty acid desaturase,FAD6)是合成γ-亞麻酸的關鍵和限速酶,然而GLA是否惟一通過△6-脂肪酸脫飽和酶途徑合成則目前還沒有報道。作者以卷枝毛霉Mucor circinelloides EIM10 sp.為研究對象,以其FAD6基因的5'端啟動子和3'端終止子為同源臂,潮霉素B抗性基因為篩選標記,構建了M.circinelloides EIM10 sp.△6-脂肪酸脫飽和酶FAD6的敲除載體p UMCD6-Hm B,轉化進入制備好的原生質體中成功地敲除了FAD6基因,發(fā)現(xiàn)FAD6基因缺陷菌株GLA質量濃度比野生型對照菌株降低了50%以上,但GLA并沒有完全消失,說明卷枝毛霉生物體內還有其他代謝途徑可以將碳源轉化為GLA。
[Abstract]:緯-linolenic acid (GLAs) is an important polyunsaturated fatty acid which is necessary for human body and has many physiological functions.The results showed that 6-Fatty acid desaturase (FAD6) was the key and rate-limiting enzyme for the synthesis of 緯 -linolenic acid in GLA producing strains, but whether GLA was only synthesized by 6-fatty acid desaturase pathway had not been reported.Mucor circinelloides EIM10 sp.In this study, the 5'terminal promoter and the 3'terminus of FAD6 gene were used as homologous arms. Hygromycin B resistance gene was selected as a screening marker.The knockout vector p UMCD6-Hm B of M.circinelloides EIM10 sp. 6- fatty acid desaturase FAD6 was constructed, and the FAD6 gene was successfully knocked out in the prepared protoplast. It was found that the GLA mass concentration of FAD6 gene deficient strain was more than 50% lower than that of wild type control strain.However, GLA did not completely disappear, suggesting that there are other metabolic pathways in the organism that can convert carbon source into GLAs.
【作者單位】: 福建生物工程職業(yè)技術學院;福建師范大學工業(yè)微生物發(fā)酵技術國家地方聯(lián)合工程研究中心;
【基金】:福建省自然科學基金重大項目(2011H6007);福建省自然科學基金面上項目(2016J01148) 福建省科技計劃項目(2014Y2008) 福建省中青年教師教育科研項目(JAT160768)
【分類號】:Q78
【參考文獻】
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【共引文獻】
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,本文編號:1773511
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