擬南芥蛋白激酶基因BIN2的原核表達純化及其酶活性分析
本文選題:BIN + SUMO ; 參考:《西北林學院學報》2017年03期
【摘要】:為了研究蛋白激酶BIN2(BR-insensitive-2)的底物及其在BR信號通路中的作用機制,通過One Step Cloning方法將BIN2基因克隆至SUMO表達載體,利用SUMO標簽促進目的蛋白表達和折疊的特性,對BIN2蛋白進行原核表達和純化,進而檢測BIN2的激酶活性。結(jié)果表明,純化得到的BIN2具有自身磷酸化活性,并測得其酶活大小和動力學曲線。為進一步研究BIN2蛋白的作用機制提供了基礎材料。
[Abstract]:In order to study the substrate of protein kinase BIN2 (BIN2) BR-insensitive-2 and its mechanism in Br signaling pathway, the BIN2 gene was cloned into SUMO expression vector by One Step Cloning. SUMO tags were used to promote the expression and folding of the target protein.The prokaryotic expression and purification of BIN2 protein were performed to detect the activity of BIN2 kinase.The results showed that the purified BIN2 had self-phosphorylation activity, and its enzyme activity and kinetic curve were measured.It provides a basic material for further study on the mechanism of BIN2 protein.
【作者單位】: 西北農(nóng)林科技大學生命科學學院;西北農(nóng)林科技大學旱區(qū)生物質(zhì)能研究中心;
【基金】:西北農(nóng)林科技大學引進人才啟動項目(Z111021314)
【分類號】:Q946
【參考文獻】
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,本文編號:1762484
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