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利用pmi標(biāo)記基因篩選培育轉(zhuǎn)EaDREB2B基因甘蔗

發(fā)布時間:2018-04-16 07:58

  本文選題:甘蔗 + pmi基因; 參考:《植物研究》2017年03期


【摘要】:利用已構(gòu)建的植物表達(dá)載體prd29a-dreb-hyg,通過酶切連接到含有磷酸甘露糖異構(gòu)酶基因(pmi)的表達(dá)質(zhì)粒pZMLR14上,構(gòu)建植物表達(dá)載體pDREB-PMI。利用基因槍轟擊轉(zhuǎn)化甘蔗愈傷,經(jīng)過甘露糖篩選,共獲51株抗性苗,轉(zhuǎn)化再生頻率為4.25%。對轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行分子檢測,結(jié)果表明有8株為陽性轉(zhuǎn)基因無性系。氯酚紅試驗(yàn)表明標(biāo)記磷酸甘露糖異構(gòu)酶基因在轉(zhuǎn)基因株系中均有表達(dá)。對轉(zhuǎn)基因T_1代甘蔗植株進(jìn)行分子檢測,結(jié)果表明EaDREB2B基因在轉(zhuǎn)基因甘蔗無性系T_1代中穩(wěn)定遺傳。該結(jié)果為進(jìn)一步研究EaDREB2B基因在甘蔗抗旱方面的作用奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:The plant expression vector pDREB-PMIM was constructed by digesting the plant expression vector prd29a-dreb-hyg to the expression plasmid pZMLR14 containing the gene of mannose phosphate isomerase.The callus of sugarcane was transformed by bombardment with gene gun, 51 resistant seedlings were obtained by mannose screening, and the frequency of transformation and regeneration was 4.25%.Molecular analysis of transgenic plants showed that there were 8 positive transgenic clones.Chlorophenol red assay showed that the labeled mannose phosphate isomerase gene was expressed in transgenic lines.The results of molecular detection of transgenic sugarcane plants showed that EaDREB2B gene was inherited steadily in the first generation of transgenic sugarcane clones.The results laid a foundation for further study on the role of EaDREB2B gene in sugarcane drought resistance.
【作者單位】: 井岡山大學(xué)生命科學(xué)院;福建農(nóng)林大學(xué)農(nóng)業(yè)部甘蔗生理生態(tài)與遺傳改良重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:江西省科技廳科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(20122BBF60135) 江西省教育廳科技計(jì)劃項(xiàng)目(GJJ13543)~~
【分類號】:S566.1

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本文編號:1757970

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