利用pmi標記基因篩選培育轉EaDREB2B基因甘蔗
本文選題:甘蔗 + pmi基因 ; 參考:《植物研究》2017年03期
【摘要】:利用已構建的植物表達載體prd29a-dreb-hyg,通過酶切連接到含有磷酸甘露糖異構酶基因(pmi)的表達質粒pZMLR14上,構建植物表達載體pDREB-PMI。利用基因槍轟擊轉化甘蔗愈傷,經過甘露糖篩選,共獲51株抗性苗,轉化再生頻率為4.25%。對轉基因植株進行分子檢測,結果表明有8株為陽性轉基因無性系。氯酚紅試驗表明標記磷酸甘露糖異構酶基因在轉基因株系中均有表達。對轉基因T_1代甘蔗植株進行分子檢測,結果表明EaDREB2B基因在轉基因甘蔗無性系T_1代中穩(wěn)定遺傳。該結果為進一步研究EaDREB2B基因在甘蔗抗旱方面的作用奠定了基礎。
[Abstract]:The plant expression vector pDREB-PMIM was constructed by digesting the plant expression vector prd29a-dreb-hyg to the expression plasmid pZMLR14 containing the gene of mannose phosphate isomerase.The callus of sugarcane was transformed by bombardment with gene gun, 51 resistant seedlings were obtained by mannose screening, and the frequency of transformation and regeneration was 4.25%.Molecular analysis of transgenic plants showed that there were 8 positive transgenic clones.Chlorophenol red assay showed that the labeled mannose phosphate isomerase gene was expressed in transgenic lines.The results of molecular detection of transgenic sugarcane plants showed that EaDREB2B gene was inherited steadily in the first generation of transgenic sugarcane clones.The results laid a foundation for further study on the role of EaDREB2B gene in sugarcane drought resistance.
【作者單位】: 井岡山大學生命科學院;福建農林大學農業(yè)部甘蔗生理生態(tài)與遺傳改良重點實驗室;
【基金】:江西省科技廳科技支撐計劃項目(20122BBF60135) 江西省教育廳科技計劃項目(GJJ13543)~~
【分類號】:S566.1
【相似文獻】
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,本文編號:1757970
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