本文選題：結(jié)直腸腫瘤 + KISS基因��； 參考：《吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2017年03期

【摘要】：目的:探討慢病毒轉(zhuǎn)染KISS1基因過表達對結(jié)直腸癌HCT116細(xì)胞增殖、侵襲和遷移能力的影響,并闡明其作用機制。方法:選取KISS1基因低表達結(jié)直腸癌細(xì)胞株,構(gòu)建慢病毒載體并轉(zhuǎn)染KISS1基因,分為對照組(PBS處理)、空載體組(轉(zhuǎn)染空載體)和過表達組(轉(zhuǎn)染含KISS1載體)。熒光顯微鏡檢查轉(zhuǎn)染的熒光率(MOI),Real-time PCR和Western blotting法檢測各組細(xì)胞中KISS1 mRNA和蛋白(metastin)的表達量,采用CCK-8法檢測各組細(xì)胞增殖活力,Transwell小室法檢測各組細(xì)胞侵襲和遷移能力。結(jié)果:LoVo、SW620、SW480、HCT-116和HT29細(xì)胞中,HCT-116細(xì)胞中KISS1 mRNA和蛋白表達量相對最低,因此篩選其作為研究載體。包裝有KISS1基因的慢病毒感染HCT-116細(xì)胞后,能夠穩(wěn)定表達增強綠色熒光蛋白(EGFP)基因,MOI均80%。與對照組和空載體組比較,過表達組細(xì)胞中KISS1 mRNA和蛋白表達量明顯升高(P0.05),細(xì)胞增殖活力明顯降低(P0.05),侵襲能力和遷移能力亦明顯下降(P0.05);與對照組比較,空載體組細(xì)胞增殖活力、侵襲能力和遷移能力差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:慢病毒轉(zhuǎn)染KISS1基因能夠過表達KISS1蛋白及抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖、侵襲及遷移能力,其機制可能與KISS1蛋白表達有關(guān)。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of lentivirus-transfected KISS1 gene overexpression on the proliferation, invasion and migration of colorectal cancer HCT116 cells, and to elucidate its mechanism.Methods: Lentivirus vector was constructed from colorectal cancer cell line with low expression of KISS1 gene and transfected with KISS1 gene. It was divided into three groups: control group, empty vector group (transfected empty vector) and overexpression group (transfected with KISS1 vector).Fluorescence microscopy was used to detect the expression of KISS1 mRNA and protein metastin by real-time PCR and Western blotting, and the ability of cell invasion and migration was detected by CCK-8 assay.Results the expression of KISS1 mRNA and protein in HT29 cells was the lowest, so they were selected as research vectors.After infected with lentivirus containing KISS1 gene, HCT-116 cells could stably express the enhanced green fluorescent protein (EGFP) gene moi 80.Compared with the control group and the empty vector group, the expression of KISS1 mRNA and protein in the overexpression group was significantly higher than that in the control group, and the cell proliferation activity was significantly decreased, the invasion ability and migration ability were also significantly decreased, and the proliferative activity of the empty vector group was significantly decreased compared with the control group, and the cell proliferation activity of the empty vector group was significantly lower than that of the control group.There was no significant difference in invasion ability and migration ability (P 0.05).Conclusion: lentivirus transfection of KISS1 gene can over-express KISS1 protein and inhibit the ability of proliferation, invasion and migration of colorectal cancer cells. The mechanism may be related to the expression of KISS1 protein.
【作者單位】： 福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院胃腸外科2區(qū);
【基金】：福建省教育廳中青年教師教育科研項目資助課題(JB13386) 福建醫(yī)科大學(xué)苗圃基金項目資助課題(2014MP020);福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)科帶頭人培養(yǎng)專項基金資助課題(JXK201303)
【分類號】：R735.34

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本文編號：1748324