本文選題：建蘭花葉病毒 + RdRp　； 參考：《植物病理學(xué)報》2017年03期

【摘要】：采用RT-PCR技術(shù)擴增出建蘭花葉病毒貴州分離物(CyMV-GZ)的依賴RNA的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)基因保守序列。測序結(jié)果表明:該RdRp基因序列長735 bp,編碼245個氨基酸殘基。構(gòu)建原核表達(dá)載體pET32a(+)-RdRp,將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3),在37℃以0.3 mmol·L~(-1) IPTG誘導(dǎo)表達(dá)分子量約49 kDa重組蛋白。以該重組蛋白為抗原免疫小鼠,制備的抗體效價達(dá)1∶204 800。間接ELISA檢測顯示該多抗與CyMV病葉汁發(fā)生特異性免疫反應(yīng),而與其他6種同屬或不同屬病毒葉汁無血清學(xué)交叉反應(yīng)。本實驗為進(jìn)一步研究RdRp的功能以及從分子水平上探討該病毒的致病機制奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:RT-PCR technique was used to amplify the conserved sequence of the RNA dependent RNA polymerase RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) gene of CyMV-GZ, a Guizhou isolate of Jianlan Mosaic virus.The sequencing results show that the RdRp gene is 735 BP long and encodes 245 amino acid residues.A prokaryotic expression vector pET32a was constructed. The recombinant plasmid was transformed into Escherichia coli BL21DDE3H, and the molecular weight of 49 kDa recombinant protein was induced by IPTG at 37 鈩，

本文編號：1747109