本文選題：叉頭框蛋白O + 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A��； 參考：《第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年03期

【摘要】：目的通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)在角質(zhì)細(xì)胞中過(guò)表達(dá)或沉默叉頭框蛋白O1(FOXO1)基因,研究其對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A(VEGF-A)蛋白水平和轉(zhuǎn)錄活性的影響。方法采用體外細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染方法,分別用ON-TARGET plus SMART pool人FOXO1siRNA和對(duì)照siRNA(ON-TARGET plus Non-targeting Control Pool)轉(zhuǎn)染人永生化牙齦角質(zhì)細(xì)胞(human immortalized gingival keratinocyte,HIGK),用免疫熒光法檢測(cè)HIGK中FOXO1和VEGF-A的免疫熒光強(qiáng)度,熒光酶素實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)FOXO1過(guò)表達(dá)和FOXO1沉默時(shí)VEGF-A的活性。結(jié)果與未轉(zhuǎn)染組相比,使用FOXO1siRNA轉(zhuǎn)染的HIGK中VEGF-A的蛋白水平降低了57%(P0.05)。熒光酶素實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果顯示,在HIGK中過(guò)表達(dá)FOXO1后VEGF-A的轉(zhuǎn)錄活性增加了2.1倍(P0.05),而FOXO1沉默時(shí)VEGF-A的轉(zhuǎn)錄活性減少了20%~43%(P0.05)。結(jié)論角質(zhì)細(xì)胞中FOXO1參與VEGF-A的表達(dá)調(diào)控。
[Abstract]:Objective by in vitro experiments in keratinocytes overexpressing or silencing forkhead box protein O1 (FOXO1) gene on vascular endothelial growth factor A (VEGF-A) the effect of protein level and transcriptional activity. Methods using in vitro cell culture and transfection method, respectively using ON-TARGET plus SMART pool FOXO1siRNA siRNA (ON-TARGET plus Non-targeting and control Control Pool) transfected immortalized human gingival keratinocytes (human immortalized gingival keratinocyte, HIGK), the fluorescence intensity FOXO1 and VEGF-A detection in HIGK by immunofluorescence, luciferase experiment were used to detect the activity of VEGF-A FOXO1 expression and FOXO1 silencing. Results compared with untransfected group, VEGF-A protein levels using FOXO1siRNA transfection HIGK decreased by 57% (P0.05). Luciferase experiment results show that overexpression of FOXO1 VEGF-A transcription activity increased by 2.1 in HIGK (P0.05), while the transcriptional activity of VEGF-A decreased by 20%~43% (P0.05) when FOXO1 was silent. Conclusion FOXO1 was involved in the regulation of VEGF-A expression in keratinocytes.

【作者單位】： 第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)海醫(yī)院口腔科;上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院口腔科;
【基金】：上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院基金(134525)~~
【分類號(hào)】：R781.5

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本文編號(hào)：1736667