RNA干擾低分子重量蛋白2基因?qū)δX缺血大鼠血腦屏障的影響
本文選題:免疫蛋白酶體 + RNA干擾低分子重量蛋白; 參考:《中國臨床藥理學(xué)雜志》2017年17期
【摘要】:目的觀察RNA干擾免疫蛋白酶體亞基低分子重量蛋白2(LMP2)對腦缺血再灌注大鼠血腦屏障結(jié)構(gòu)相關(guān)蛋白閉合蛋白(Occludin)和閉鎖小帶蛋白(ZO~(-1))表達(dá)的影響。方法線栓法制作SD大鼠大腦中動脈阻塞再灌注(MCAO)模型,腦缺血1 h再灌注72 h。按照體重將SD大鼠隨機(jī)分為3組:假手術(shù)組、實(shí)驗(yàn)組和對照組,每組10只。在MCAO術(shù)前1 h,實(shí)驗(yàn)組和對照組分別立體定位地腦內(nèi)注射慢病毒載體LMP2-shRNA和陰性對照shRNA液體。以免疫印跡法分析Occludin、ZO~(-1)蛋白表達(dá),用伊文思藍(lán)(EB)示蹤法監(jiān)測血腦屏障損傷程度。結(jié)果 Occludin蛋白與ZO~(-1)蛋白的灰度值:假手術(shù)組、對照組和實(shí)驗(yàn)組分別1.76±0.09,1.37±0.12;0.24±0.07,0.26±0.07;0.83±0.11,0.74±0.09,與假手術(shù)組比較,對照組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.001);與對照組比較,實(shí)驗(yàn)組差異也均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P0.001)。腦組織EB含量:假手術(shù)組、對照組和實(shí)驗(yàn)組分別(3.32±0.14),(11.41±0.21),(6.23±0.28)μg·g~(-1),與假手術(shù)組比較,對照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001);與對照組比較,實(shí)驗(yàn)組差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。結(jié)論沉默LMP2基因表達(dá)可顯著改善大鼠腦缺血后血腦屏障透通性。
[Abstract]:Objective To observe the effect of RNA interference immunity of proteasome subunit low molecular weight protein 2 (LMP2) on cerebral ischemia reperfusion related protein structure of rat blood brain barrier occluden (Occludin) and zonula occludens protein (ZO~ (-1)) on the expression of reperfusion of portal obstruction. Methods MCAO SD in the rat brain (MCAO) model, 1 h ischemia and 72 h. reperfusion in accordance with the weight of the SD rats were randomly divided into 3 groups: sham operation group, experimental group and control group, 10 rats in each group. In MCAO 1 h before operation, the experimental group and the control group received stereotactic brain injection of lentiviral vector LMP2-shRNA and negative control shRNA liquid. With immunoblotting analysis of Occludin, ZO~ (-1) protein expression by Evans blue (EB) tracer monitoring blood brain barrier damage. The results of Occludin protein and ZO~ protein (-1) of the gray value: sham operation group, control group and experimental group were 1.76 + 0.09,1.37 + 0.12; 0.24 + 0.07,0.26 + 0. 07; 0.83 + 0.11,0.74 + 0.09, compared with the sham group, the control group had significant difference (P0.001); compared with the control group, the experimental group differences were statistically significant (P0.001). The content of EB in brain tissue of sham operation group, control group and experimental group respectively (3.32 + 0.14), (11.41 + 0.21), (6.23 + 0.28) g - g~ (-1), compared with the sham group, control group (P0.001); compared with the control group, there were significant differences between the experimental group (P0.001). Conclusion LMP2 silencing can significantly improve blood after cerebral ischemia in rats brain barrier permeability.
【作者單位】: 福建醫(yī)科大學(xué)省立臨床醫(yī)學(xué)院福建省立醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;福建醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)系;
【基金】:國家自然科學(xué)基金面上基金資助項(xiàng)目(81771250) 福建省自然科學(xué)基金面上基金資助項(xiàng)目(2016J01432) 福建省衛(wèi)生系統(tǒng)中青年骨干人才培養(yǎng)項(xiàng)目基金資助項(xiàng)目(2015-ZQN-JC-5)
【分類號】:R743.3
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