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雞源多殺性巴氏桿菌的分離鑒定及其毒力基因的檢測(cè)

發(fā)布時(shí)間:2018-04-08 15:05

  本文選題:多殺性巴氏桿菌 切入點(diǎn):分離 出處:《中國獸醫(yī)科學(xué)》2017年07期


【摘要】:取病死雞肝接種于血清瓊脂平板,挑取符合巴氏桿菌特征的單菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)和染色鏡檢;對(duì)純培養(yǎng)菌提取核酸,進(jìn)行16S r RNA、kmt1和cap A基因的PCR鑒定,7個(gè)管家基因的PCR擴(kuò)增和多位點(diǎn)序列分型,以及12個(gè)毒力基因的PCR檢測(cè);并進(jìn)行分離菌的動(dòng)物回歸試驗(yàn)。結(jié)果顯示,分離的2株病原菌(HN-1和CZ-6)均為兩極濃染的革蘭陰性短桿菌,16S r RNA和kmt1基因序列與多殺性巴氏桿菌的同源性均高于99%,莢膜血清型鑒定為A型,基因型為ST129型,除tox A、ptf A、nan H之外的9個(gè)毒力基因均被檢出,動(dòng)物回歸試驗(yàn)表明分離菌對(duì)雞的致病性較強(qiáng)。結(jié)果表明,這2株雞源多殺性巴氏桿菌的分離鑒定為我國禽源菌株的遺傳特性研究提供了一定參考。
[Abstract]:The dead chicken liver was collected and inoculated on the Agar plate of serum, and the single colony with the characteristic of Pasteurella was selected for purification and staining, and nucleic acid was extracted from the pure culture bacteria.The 16s r RNA-kmt1 and cap A genes were identified by PCR, 7 housekeeping genes were amplified by PCR and multilocus sequence typing, and 12 virulence genes were detected by PCR, and the animal regression test of isolated bacteria was carried out.The results showed that the sequences of 16s r RNA and kmt1 genes of Gram-negative short bacilli (HN-1 and CZ-6) were higher than those of Pasteurella multocida. The capsular serotypes were identified as type A and genotypes were ST129.All the 9 virulence genes except tox PTF Agnan H were detected. The animal regression test showed that the isolated bacteria had strong pathogenicity to chicken.The results showed that the isolation and identification of these two strains of Pasteurella multocida from chickens provided some references for the study of genetic characteristics of avian strains in China.
【作者單位】: 安徽科技學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院;河南省駐馬店市畜牧局;
【基金】:安徽省教育廳自然科學(xué)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(KJ2016A822) 安徽科技學(xué)院自然科學(xué)研究項(xiàng)目(ZRC2016497)
【分類號(hào)】:S852.612

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本文編號(hào):1722134

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