miR133a通過下調(diào)Gdnf基因表達(dá)抑制輸尿管芽的發(fā)育
本文選題:微RNA 切入點(diǎn):miR133a 出處:《重慶醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文
【摘要】:該研究預(yù)測并驗(yàn)證了在后腎間充質(zhì)細(xì)胞中miR133a對輸尿管芽發(fā)育關(guān)鍵因子Gdnf(glial cell line derived neurotrophic factor)基因表達(dá)的調(diào)控作用,探討了其抑制輸尿管芽發(fā)育的作用。通過生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn),Gdnf mRNA 3′Untranslated Regions(3′UTR)在不同物種間高度保守,并且存在miR133a等的結(jié)合位點(diǎn)。雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?yàn)顯示,miR133a可以結(jié)合在Gdnf mRNA 3′UTR上。Real-time PCR和Western blot結(jié)果證實(shí),mi R133a顯著地抑制了Gdnf的mRNA水平和蛋白質(zhì)水平。 解離重聚‖胚腎離體培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,miR133a抑制輸尿管芽的發(fā)育。該研究結(jié)果表明,miR133a通過靶向結(jié)合于Gdnf mRNA的3′UTR,下調(diào)Gdnf基因的表達(dá),并抑制輸尿管芽的發(fā)育。
[Abstract]:This study predicts and verifies the role of miR133a in regulating the expression of Gdnf(glial cell line derived neurotrophic factor, a key factor in the development of ureteral bud, in posterior renal mesenchymal cells, and discusses its role in inhibiting the development of ureteral bud.Through bioinformatics analysis, it was found that Gdnf mRNA 3'Untranslated region ~ (3) UTRs were highly conserved among different species, and that there were binding sites for miR133a et al.The results of double luciferase reporter gene experiment showed that miR133a could bind to Gdnf mRNA 3'UTR. Real-time PCR and Western blot. The results showed that MMI R133a significantly inhibited the mRNA level and protein level of Gdnf.It showed that miR133a inhibited the development of ureteral bud.The results of this study indicate that miR133a down-regulates the expression of Gdnf gene and inhibits the development of ureteral buds by targeting the Gdnf mRNA.
【學(xué)位授予單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R3416
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,本文編號:1718014
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