發(fā)布時間：2018-04-05 09:25

  本文選題：小鼠　切入點(diǎn)：基因敲除　出處：《中國循環(huán)雜志》2017年08期

【摘要】：目的:探討敲除野生型p53誘導(dǎo)的磷酸酶1(Wip1)基因?qū)π∈笮墓δ艿挠绊懠靶呐K組織中基因和蛋白表達(dá)水平的變化。方法:隨機(jī)選取野生型(WT)小鼠和Wip1基因敲除(Wip1-KO)小鼠各10只,分別檢測兩組小鼠的心功能和心重/體重比,應(yīng)用蘇木精伊紅(HE)染色觀察小鼠心肌組織的病理形態(tài),應(yīng)用實(shí)時定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測心肌組織中心房利鈉肽(ANP)、B型利鈉肽(BNP)、單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)和α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的基因表達(dá)水平,并應(yīng)用蛋白免疫印跡(Western blot)檢測凋亡相關(guān)蛋白包括B淋巴細(xì)胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴細(xì)胞瘤-2相關(guān)X蛋白(Bax)和活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(c-Caspase3)的表達(dá)水平。結(jié)果:與WT組小鼠相比,Wip1-KO組小鼠心肌組織中Wip1 mRNA表達(dá)明顯降低(P0.05),左心室射血分?jǐn)?shù)和左心室縮短分?jǐn)?shù)降低(P0.05),左心室收縮末期內(nèi)徑增大(P0.05)。雖然Wip1-KO組小鼠與WT小鼠的心臟重量沒有差異,但Wip1-KO組小鼠體重較WT組小鼠減輕(P0.05),心重/體重比增加(P0.05)。HE染色顯示W(wǎng)ip1-KO組小鼠的心肌形態(tài)與WT組小鼠之間沒有明顯差異。心肌組織中ANP、BNP、MCP-1和α-SMA基因表達(dá)水平在兩組小鼠之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Wip1-KO組小鼠心肌組織中凋亡相關(guān)蛋白Bax/Bcl-2和c-Caspase3表達(dá)水平與WT組小鼠之間沒有明顯差異(P0.05)。結(jié)論:敲除Wip1基因可以損害小鼠心功能,但相關(guān)的機(jī)制還有待進(jìn)一步闡明。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of knockout p53 induced phosphatase 1 (Wip1) gene on cardiac function and the changes of gene and protein expression in heart tissue of mice.Methods: the cardiac function and heart weight / body weight ratio were measured in 10 wild type WTW mice and 10 Wip1 knockout Wip1-KOO mice. The pathological morphology of myocardial tissue was observed by hematoxylin eosin (HEH) staining.Real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to detect the gene expression levels of atrial natriuretic peptide (ANPP) B type natriuretic peptide (BNPP), monocyte chemotactic protein (MCP-1) and 偽 -SMA-1 in cardiac tissue.The expression of apoptosis-related proteins, including B lymphocytoma Bcl-2 associated X protein Baxand activated cysteine aspartate protease -3c-Caspase3, was detected by Western blot.Results: compared with WT group, the expression of Wip1 mRNA in myocardium of Wip1-KO group decreased significantly (P 0.05), left ventricular ejection fraction (LVEF) and left ventricular shortening fraction decreased (P 0.05), and left ventricular end-systolic diameter increased (P 0.05).Although there was no difference in heart weight between Wip1-KO group and WT mice, the weight of mice in Wip1-KO group was lower than that in WT group, and the increase of heart weight / body weight ratio showed that there was no significant difference in myocardial morphology between Wip1-KO group and WT group.Conclusion: knockout of Wip1 gene can damage cardiac function in mice, but the related mechanism needs to be further elucidated.
【作者單位】： 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院國家心血管病中心阜外醫(yī)院;中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物研究所北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院比較醫(yī)學(xué)中心;中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81270288,81541095)
【分類號】：R54

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本文編號：1714166