溶藻弧菌中酯酶基因的克隆表達(dá)及其酶學(xué)性質(zhì)研究
本文選題:溶藻弧菌 切入點(diǎn):酯酶 出處:《生物技術(shù)通報》2017年06期
【摘要】:旨在克隆溶藻弧菌中的酯酶基因,并在大腸桿菌中異源表達(dá),研究酯酶酶學(xué)性質(zhì)。從溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)7S-1的基因組DNA中克隆得到酯酶基因est Z,將該基因連接入表達(dá)載體p ET28a,并在Escherichia coli BL21(DE3)中表達(dá),對純化后的酯酶蛋白進(jìn)行酶學(xué)性質(zhì)分析。結(jié)果顯示,表達(dá)菌株E.coli BL21-28a-est Z可高表達(dá)具有活性的酯酶,在18℃添加0.4 mmol/L IPTG的LB培養(yǎng)基中誘導(dǎo)22 h,酯酶的比酶活可達(dá)5.42 U/μg;重組表達(dá)的酯酶Est Z最適反應(yīng)溫度為25℃,最適pH為9.0。10 mmol/L Na+和Mg~(2+)對其有較好的激活作用;Cu~(2+)、Ni~(2+)、Co~(2+)對該酶活性有較大抑制。該酶對多種有機(jī)溶劑及表面活性劑具有一定的耐受性,同時具有較高的耐鹽性。對溶藻弧菌中的酯酶進(jìn)行研究為該菌更好的應(yīng)用于生物脫墨技術(shù)奠定了理論基礎(chǔ)。
[Abstract]:The esterase gene est Z was cloned from the genomic DNA of Vibrio mimicolyticus and expressed in E . coli BL21 ( DE3 ) . The results showed that the expression of E . coli BL21 - 28a - est Z could be highly expressed in Escherichia coli BL21 ( DE3 ) . The results showed that the expression of E . coli BL21 - 28a - est Z had a better activation effect on the activity of the enzyme .
【作者單位】: 中國石油大學(xué)(華東);
【基金】:山東省中青年科學(xué)家科研獎勵基金(ZR2016CB11) 中央高;究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金(16CX02043A)
【分類號】:Q78;Q936
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1 丁q,
本文編號:1711590
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