發(fā)布時(shí)間：2018-04-02 08:02

  本文選題：腺病毒科　切入點(diǎn)：分型　出處：《軍事醫(yī)學(xué)》2017年02期

【摘要】：目的建立一種高通量、快速、準(zhǔn)確甄別3、7、14、11和55型腺病毒的化學(xué)發(fā)光基因芯片方法。方法從GenBank中查找這5種腺病毒特異性基因保守區(qū),設(shè)計(jì)分型的探針并在篩選后進(jìn)行合成,用于制備寡核苷酸基因芯片。運(yùn)用多重不對(duì)稱PCR法擴(kuò)增特異性基因片段,將擴(kuò)增產(chǎn)物與基因芯片上的特異性探針雜交,經(jīng)過洗滌、化學(xué)發(fā)光顯色后,進(jìn)行結(jié)果分析。在優(yōu)化的多重PCR體系、雜交條件和化學(xué)發(fā)光檢測(cè)條件下,對(duì)芯片的特異性、靈敏性和重復(fù)性進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果建立的基因芯片方法具有良好的特異性、靈敏性和重復(fù)性,檢測(cè)質(zhì)粒參考品最低檢測(cè)限為3×10~3拷貝/反應(yīng),38例臨床樣本的分型結(jié)果與測(cè)序法結(jié)果基本一致(37/38)。結(jié)論建立了一種能快速、靈敏、特異區(qū)分5種腺病毒型別的基因芯片分型方法,為腺病毒分型提供一種新的檢測(cè)手段。
[Abstract]:Objective to establish a high throughput, rapid and accurate chemiluminescence gene chip method for identifying adenovirus type 3, 7, 1411 and 55. Methods the specific conserved regions of these five adenovirus genes were found from GenBank, the probe for typing was designed and synthesized after screening. Oligonucleotide gene chip was prepared. Specific gene fragments were amplified by multiple asymmetric PCR method. The products were hybridized with specific probes on the gene chip. After washing and chemiluminescence reaction, The results were analyzed. The specificity, sensitivity and repeatability of the microarray were evaluated under the optimized multiplex PCR system, hybridization conditions and chemiluminescence detection conditions. Sensitivity and reproducibility. The minimum detection limit of plasmid reference was 3 脳 10 ~ (-3) copy / reaction. The typing results of 38 clinical samples were in good agreement with the results of sequencing method. Conclusion A rapid and sensitive method was established. The gene chip typing method which specifically distinguishes 5 adenovirus types provides a new detection method for adenovirus typing.
【作者單位】： 河北北方學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所;解放軍309醫(yī)院;
【基金】：國家科技重大專項(xiàng)“重大新藥創(chuàng)制”資助項(xiàng)目(2015ZX09J15105-001-001)
【分類號(hào)】：R440;R511

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉平;;我國首片應(yīng)用型基因芯片誕生[J];適用技術(shù)市場(chǎng);2000年06期

2 樸賢玉,岳麗玲,王玉;基因芯片研究新進(jìn)展及其應(yīng)用[J];中國優(yōu)生與遺傳雜志;2004年06期

3 ;國內(nèi)外基因芯片開發(fā)狀況[J];中華放射腫瘤學(xué)雜志;2005年03期

4 ;能診斷癌癥的基因芯片[J];生物醫(yī)學(xué)工程研究;2005年02期

5 伍亞舟;易東;黃明輝;李輝智;;局部均值化方法在基因芯片標(biāo)準(zhǔn)化中的應(yīng)用研究[J];中國衛(wèi)生統(tǒng)計(jì);2005年06期

6 嚴(yán)廣斌;;基因芯片[J];中華關(guān)節(jié)外科雜志(電子版);2010年04期

7 孫文德;;基因芯片將成為診斷疾病的“神醫(yī)”[J];科學(xué)與文化;1999年06期

8 李瑤,陳菊祥,裘敏燕,應(yīng)康,陳沁,符薇,王品,沈嫻,謝毅,毛裕民;基因芯片的制備研究[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2000年09期

9 何津春,彭曉;基因芯片[J];蘭州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2001年04期

10 徐曉飛,林煒鐵,馮杰龍;基因芯片在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用[J];上海生物醫(yī)學(xué)工程;2001年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 申琦;石偉民;梅楨;;基因芯片數(shù)據(jù)解析算法研究[A];第十屆全國計(jì)算(機(jī))化學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2009年

2 周魯衛(wèi);;基因芯片研究開發(fā)的基礎(chǔ)[A];2000上�？萍颊搲疊IO-X研討會(huì)暨中德醫(yī)學(xué)生物物理和上海流變學(xué)研討會(huì)論文集[C];2000年

3 敖琳;高利宏;胡冉;劉晉yN;周艷虹;楊錄軍;楊夢(mèng)蘇;曾志雄;方志俊;曹佳;;毒理基因芯片的研制及初步應(yīng)用[A];中國毒理學(xué)會(huì)第二屆全國中青年學(xué)者科技論壇會(huì)議論文集[C];2007年

4 劉麗玲;王秀榮;陳化蘭;;基因芯片的研究進(jìn)展[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜傳染病學(xué)分會(huì)成立20周年慶典暨第十次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（上）[C];2003年

5 郝麟;朱平;于曉梅;張大成;歐陽建華;趙新生;;PCR基因芯片上熒光PCR反應(yīng)的研究[A];第九屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2003年

6 尚世強(qiáng);;基因芯片[A];2008年浙江省檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

7 劉全海;;基因芯片和新藥研制[A];中國藥理學(xué)會(huì)第九屆制藥工業(yè)藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2000年

8 白志軍;舒文杰;謝紅衛(wèi);伯曉晨;林汝仙;王升啟;;微生物檢測(cè)基因芯片探針的遺傳優(yōu)化設(shè)計(jì)[A];第十次中國生物物理學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2006年

9 王虹崢;英子;;基因芯片技術(shù)與中藥現(xiàn)代化[A];全面建設(shè)小康社會(huì)：中國科技工作者的歷史責(zé)任——中國科協(xié)2003年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（上）[C];2003年

10 顧劍;彭少華;;臨床微生物基因芯片診斷技術(shù)[A];湖北省暨武漢市微生物學(xué)會(huì)分析微生物專業(yè)委員會(huì)第十屆第五次學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 全景;星湖科技向基因芯片公司投巨資[N];中國企業(yè)報(bào);2000年

2 ;基因醫(yī)學(xué)產(chǎn)業(yè) 江蘇高新技術(shù)領(lǐng)域的重中之重[N];科技日?qǐng)?bào);2000年

3 西部證券研發(fā)中心 遠(yuǎn)征;基因芯片 潛力發(fā)揮需時(shí)日[N];中國證券報(bào);2001年

4 齊亞鳳　記者 王夕;基因芯片≠包治百病[N];北京科技報(bào);2013年

5 齊亞鳳　記者 王夕;基因芯片帶來醫(yī)學(xué)革命[N];北京科技報(bào);2013年

6 平安證券綜合研究所 馬超 高利;基因芯片：方寸之間天地寬[N];中國證券報(bào);2000年

7 記者 季洪光;基因芯片可望大規(guī)模臨床應(yīng)用[N];科技日?qǐng)?bào);2003年

8 ;基因芯片——新世紀(jì)醫(yī)學(xué)的“寵兒”[N];市場(chǎng)報(bào);2001年

9 周向東;基因芯片：神奇的醫(yī)生[N];中國醫(yī)藥報(bào);2001年

10 匯正財(cái)經(jīng);G星湖 主升浪在即[N];證券時(shí)報(bào);2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 龔小會(huì);微陣列比較基因組雜交技術(shù)在出生缺陷中的運(yùn)用[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 吳清華;基因芯片載體的表面化學(xué)處理及核酸固定技術(shù)研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2005年

3 王川;基因芯片數(shù)據(jù)管理及數(shù)據(jù)挖掘[D];中國科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2004年

4 劉全俊;三類新型集成化的基因芯片及其相關(guān)儀器的研制[D];東南大學(xué);2006年

5 徐曉靜;新發(fā)腸道致病菌檢測(cè)基因芯片的研制及初步應(yīng)用[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

6 曹三杰;雞新城疫、雞傳染性支氣管炎基因芯片的構(gòu)建及其檢測(cè)技術(shù)研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

7 呂雪松;基因芯片數(shù)據(jù)處理方法及在乳腺癌數(shù)據(jù)中的應(yīng)用[D];清華大學(xué);2006年

8 吳飛珍;基因芯片數(shù)據(jù)的聚類功能評(píng)價(jià)算法和判別分析算法研究[D];上海大學(xué);2009年

9 王廣云;腫瘤基因芯片表達(dá)數(shù)據(jù)分析相關(guān)問題研究[D];國防科學(xué)技術(shù)大學(xué);2009年

10 邵麗;藥物毒理基因組信息學(xué)的若干問題研究[D];浙江大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 何莎;耐萬古霉素腸球菌檢測(cè)基因芯片方法的建立和驗(yàn)證[D];河北北方學(xué)院;2015年

2 黃寧;NDV、IBV和ILTV診斷基因芯片的構(gòu)建及初步應(yīng)用[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

3 常曉霞;豬偽狂犬病毒、豬細(xì)小病毒和豬圓環(huán)病毒2型聯(lián)合共檢可視化基因芯片檢測(cè)技術(shù)研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

4 歐陽達(dá);口蹄疫—水皰性口炎—豬水皰病聯(lián)合共檢基因芯片的構(gòu)建[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

5 馮清;表面光聚合反應(yīng)制備三維基因芯片及蛋白微陣列研究[D];北京化工大學(xué);2016年

6 楊宇;基因芯片檢測(cè)儀的關(guān)鍵技術(shù)研究[D];南京航空航天大學(xué);2016年

7 謝松e，

本文編號(hào)：1699477