本文選題：高粱　切入點(diǎn)：SRAP-PCR　出處：《分子植物育種》2017年02期

【摘要】：為建立高粱抗絲黑穗病基因最佳的SRAP-PCR反應(yīng)體系,進(jìn)一步篩選與抗病基因相關(guān)的SRAP標(biāo)記。本研究采用單因素與正交設(shè)計(jì)相結(jié)合的方法,對(duì)影響高粱SRAP-PCR體系的5個(gè)因素Taq酶、Mg2+、模板DNA、d NTPs和引物進(jìn)行優(yōu)化,以期篩選出最優(yōu)的高粱抗絲黑穗病基因SRAP-PCR反應(yīng)體系。研究表明:在優(yōu)化得到的20μL的高粱SRAP-PCR體系中,模板DNA的用量為20.0 ng,Taq DNA聚合酶的用量為0.14 U,Mg2+的濃度為3.0 mmol/L,d NTPs濃度為0.3 mmol/L,引物的濃度為0.5μmol/L。各因素對(duì)反應(yīng)體系影響大小依次為:引物濃度DNA用量Taq DNA聚合酶濃度Mg2+濃度=d NTPs濃度。本研究將為高粱抗性基因的定位與功能研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)與技術(shù)支持。
[Abstract]:In order to establish the best SRAP-PCR reaction system of sorghum resistance to head smut gene and to screen the SRAP marker related to resistance gene, the single factor and orthogonal design were used to study the effect of Taq enzyme Mg2 on sorghum SRAP-PCR system. The template DNA-d NTPs and primer were optimized to screen the optimal SRAP-PCR reaction system of sorghum smut resistance gene. The results showed that in the optimized 20 渭 L sorghum SRAP-PCR system, The dosage of template DNA was 20.0 ng / g Taq DNA polymerase 0.14 渭 mol / L NTPs was 0.3 mmol / L and primer concentration was 0.5 渭 mol / L. the effect of each factor on the reaction system was as follows: DNA concentration, Taq DNA polymerase concentration, Mg2 concentration. This study will provide basic data and technical support for the mapping and functional study of sorghum resistance genes.
【作者單位】： 山西農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院;山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究中心;農(nóng)業(yè)部黃土高原作物基因資源與種質(zhì)創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：山西省科技攻關(guān)項(xiàng)目(20140311003-4);山西省科技攻關(guān)項(xiàng)目(20130311004-3) 山西省財(cái)政支農(nóng)項(xiàng)目(2015TGSF-10) 國家公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201503121-07)共同資助
【分類號(hào)】：S435.14;Q943.2

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本文編號(hào)：1683353