本文選題：癌　切入點：肝細胞　出處：《腫瘤》2017年05期

【摘要】：目的:研究沉默DNAJ同源B亞家族成員11(DNAJ homolog subfamily B member 11,DNAJB 11)基因表達對人肝細胞癌SMMC7721細胞增殖、周期與凋亡的影響。方法:構建攜帶有針對DNAJB 11基因的DNAJB11-shRNA重組慢病毒載體pCDH-Puro/DNAJB11-shRNA,并制備重組慢病毒。將具有高效感染力的重組病毒感染SMMC7721細胞。CCK-8法檢測被感染后SMMC7721細胞的增殖情況;分別采用實時熒光定量PCR法與蛋白質印跡法檢測被感染后,SMMC7721細胞中DNAJB11、增殖細胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和促凋亡基因caspase-3 mRNA及其蛋白的表達;FCM法檢測沉默DNAJB 11基因表達后對SMMC7721細胞的周期和凋亡的影響。結果:成功構建插入DNAJB11-shRNA的重組慢病毒載體pCDH-Puro/DNAJB11-shRNA。CCK-8法檢測結果顯示,感染攜帶有DNAJB11-shRNA重組慢病毒后,SMMC7721細胞的增殖被抑制(P0.05);實時熒光定量PCR法與蛋白質印跡法檢測結果證實,DNAJB11-shRNA能有效沉默SMMC7721細胞中DNAJB11 mRNA及其蛋白的表達(P值均0.05);DNAJB 11基因沉默后,能明顯上調caspase-3 mRNA及蛋白的表達水平,并下調PCNA mRNA及蛋白的表達水平(P值均0.05)。FCM檢測結果表明,沉默DNAJB 11基因的表達可將SMMC7721細胞阻滯于細胞周期的G1期,并能促進其凋亡,差異均有統(tǒng)計學意義(P值均0.01)。結論:沉默DNAJB 11基因表達可抑制SMMC7721細胞的增殖并促進其凋亡,這可能與下調SMMC7721細胞中增殖相關蛋白PCNA的表達,上調凋亡相關蛋白caspase-3的表達有關。
[Abstract]:Aim: to study the effect of silencing 11(DNAJ homolog subfamily B member 11DNA JB11) gene expression on the proliferation of human hepatocellular carcinoma SMMC7721 cells by silencing 11(DNAJ homolog subfamily B member 11DNA JB11, a member of the homologous B subfamily of DNAJ. Methods: the recombinant lentivirus vector pCDH-PurorDNA JB11-shRNAs carrying DNAJB 11 gene was constructed, and the recombinant lentivirus was prepared. The highly infectious recombinant virus was infected with SMMC7721 cells. CCK-8 method was used to detect the proliferation of infected SMMC7721 cells. The expression of cell JB11, proliferating cell nuclear antigen-PCNA and caspase-3 mRNA and their proteins in infected SMMC7721 cells were detected by real-time fluorescence quantitative PCR and Western blot respectively. Effect of SMMC7721 cell cycle and apoptosis. Results: the recombinant lentivirus vector inserted into DNAJB11-shRNA was successfully constructed by pCDH-Puro/DNAJB11-shRNA.CCK-8 assay. After infection with DNAJB11-shRNA recombinant lentivirus, the proliferation of SMMC7721 cells was inhibited by P0.05.The results of real-time fluorescence quantitative PCR and Western blotting showed that SMMC7721 JB11-shRNA could effectively silence the expression of DNAJB11 mRNA and its protein in SMMC7721 cells after the silencing of DNAJB11 mRNA and DNAJB11 JB11 gene. The expression level of caspase-3 mRNA and protein was up-regulated, and the expression level of PCNA mRNA and protein was down-regulated by 0.05).FCM. The results showed that silencing the expression of DNAJB 11 gene could block SMMC7721 cells from G1 phase of cell cycle and promote its apoptosis. Conclusion: silencing the expression of DNAJB 11 gene can inhibit the proliferation of SMMC7721 cells and promote its apoptosis, which may be related to down-regulating the expression of proliferation-associated protein PCNA and up-regulating the expression of apoptosis-related protein caspase-3 in SMMC7721 cells.
【作者單位】： 重慶市腫瘤研究所血液腫瘤生物治療科;重慶市腫瘤研究所肝膽外科;
【基金】：重慶市應用開發(fā)計劃資助項目(編號:cstc2014yykfA110031) 中國醫(yī)師協(xié)會研究項目(編號:ZGYSXH20120701)~~
【分類號】：R735.7

【參考文獻】

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2 Fauzia Z Khan;Ryan B Perumpail;Robert J Wong;Aijaz Ahmed;;Advances in hepatocellular carcinoma: Nonalcoholic steatohepatitis-related hepatocellular carcinoma[J];World Journal of Hepatology;2015年18期

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4 Laurence J Britton;V Nathan Subramaniam;Darrell HG Crawford;;Iron and non-alcoholic fatty liver disease[J];World Journal of Gastroenterology;2016年36期

5 王江紅;李啟英;石洋;黃德鴻;南映瑜;楊濤;肖春燕;王莉;張文軍;龔奕;項穎;;人原發(fā)性肝癌相關抗原的蛋白質組學初步研究[J];第三軍醫(yī)大學學報;2017年01期

6 吳惠珍;吳恩昊;龔世鳳;曹大勇;李霄;;T細胞分化蛋白2在肝細胞癌中的表達及其臨床意義[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2016年14期

7 林曉平;孫金海;;非酒精性脂肪肝致病因素與健康管理策略[J];中國臨床醫(yī)學;2016年02期

8 吳軍錄;權文強;姚懿雯;萬海英;李冬;;維甲酸誘導基因G慢病毒表達載體的構建及對肺癌細胞A549的影響[J];中國癌癥雜志;2015年08期

9 師海蓉;陳瑩;李長雷;邱文洪;;慢病毒介導的shRNA靶向干擾I2PP2A胃癌穩(wěn)定細胞株的建立[J];中國癌癥雜志;2015年05期

【二級參考文獻】

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3 ;對人類生老病死奧秘的最新闡釋——細胞增殖、分化與凋亡[J];山東中醫(yī)學院學報;1993年04期

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8 Kase S.;SaitoW.;YokoiM. ;王文軍;;人類特發(fā)性視網膜前膜細胞增殖及谷氨酰胺合成酶的表達[J];世界核心醫(yī)學期刊文摘.眼科學分冊;2006年04期

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4 鄧錦波;牛艷麗;范文娟;劉彬;;死亡受體5與神經細胞增殖[A];河南省細胞生物學學會第二屆會員代表大會暨學術研討會論文摘要集[C];2009年

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8 徐楓;趙玫;杜菲;林梁;周啟兵;余權;黃常志;;Hsp 70與T細胞增殖的相關研究[A];第七屆全國腫瘤生物治療學術會議論文集[C];2001年

9 陳勇;呂合作;胡建國;李柏青;;可刺激人γδT細胞增殖的結核桿菌多肽抗原的生物學特性分析[A];中國免疫學會第四屆學術大會會議議程及論文摘要集[C];2002年

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2 ;自身細胞可制再生血管[N];中國環(huán)境報;2000年

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