本文選題：棕櫚酸　切入點(diǎn)：子宮內(nèi)膜細(xì)胞　出處：《沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:本研究通過Illumina HiSeq高通量測序技術(shù)全面分析高濃度棕櫚酸條件下對奶牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞功能基因表達(dá)差異,從而探究高濃度棕櫚酸對奶牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞基因表達(dá)水平的影響,為進(jìn)一步研究棕櫚酸影響奶牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞功能以及探討奶牛酮病等代謝性疾病與繁殖障礙性疾病之間的關(guān)系提供理論基礎(chǔ)。方法:本試驗(yàn)首先通過對奶牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞體外培養(yǎng),利用MTT法分別測得棕櫚酸在不同濃度下對該細(xì)胞相對存活率,篩選棕櫚酸添加濃度。之后利用高通量測序的方法,研究棕櫚酸影響奶牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞基因表達(dá)譜差異,篩選出差異表達(dá)基因。最后利用熒光定量PCR技術(shù)對篩選出來的差異基因進(jìn)行驗(yàn)證,進(jìn)一步證實(shí)棕櫚酸對奶牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞基因表達(dá)差異的影響。結(jié)果:1)成功篩選并鑒定366個(gè)顯著差異表達(dá)基因,涉及差異顯著通路202條,得到上調(diào)基因188個(gè),下調(diào)基因178個(gè)。這些基因主要參與炎性細(xì)胞因子信號通路、B細(xì)胞受體信號通路、HIF-1信號通路、胰島素分泌等多個(gè)生理過程。2)熒光定量PCR驗(yàn)證結(jié)果表明,高濃度棕櫚酸可顯著上調(diào)奶牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞TGFB1、IL6 基因表達(dá),下調(diào) VAV1、CCL28、BLNK、TGFB3、IGF1R、GPX1、SOD2等基因表達(dá),與高通量測序結(jié)果基本一致。表明高濃度棕櫚酸可通過改變上述相關(guān)功能基因表達(dá)水平從而引起奶牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞炎癥信號與氧化應(yīng)激等相關(guān)功能發(fā)生改變。結(jié)論:高濃度棕櫚酸可引起奶牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激等途徑相關(guān)基因表達(dá)差異,提示棕櫚酸可能是誘發(fā)產(chǎn)后奶牛子宮炎性疾病導(dǎo)致奶牛繁殖性能降低的重要因素。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of high concentration palmitic acid on the expression of genes in dairy cow endometrial cells by Illumina HiSeq high-throughput sequencing. In order to further study the effect of palmitic acid on the function of endometrium cells and the relationship between metabolic diseases such as ketosis and reproductive disorders in dairy cows. Endometrial cells were cultured in vitro. MTT method was used to determine the relative survival rate of palmitic acid on the cells at different concentrations and to screen palmitic acid addition concentration. Then the difference of gene expression profiles of dairy cow endometrial cells affected by palmitic acid was studied by high-throughput sequencing. The differentially expressed genes were screened. Finally, the differentially expressed genes were verified by fluorescence quantitative PCR. Results: a total of 366 differentially expressed genes were successfully screened and identified, involving 202 differentially expressed pathways, and 188 up-regulated genes were obtained. These genes are mainly involved in inflammatory cytokine signaling pathway, B cell receptor signaling pathway, HIF-1 signaling pathway, insulin secretion and other physiological processes. High concentration of palmitic acid could significantly up-regulate the expression of TGFB1nil 6 gene in bovine endometrial cells, and down-regulate the expression of VAV1 CCL28 / BLNKT TGFB3IGF1RGGFF1GPX1 / SOD2 gene. The results of high throughput sequencing indicated that high concentration of palmitic acid could change the inflammatory signal of endometrium cells and oxidative stress by changing the expression level of the above related functional genes. Conclusion: high concentration of palmitic acid can induce inflammatory reaction of dairy cow endometrial cells. The difference of gene expression related to oxidative stress suggests that palmitic acid may be an important factor in inducing postpartum inflammation of uterus in dairy cows.
【學(xué)位授予單位】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：S858.23

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本文編號：1672886