本文選題：山羊痘病毒　切入點(diǎn)：口瘡病毒　出處：《中國(guó)獸醫(yī)科學(xué)》2017年05期

【摘要】：為實(shí)現(xiàn)山羊痘病毒(GTPV)和口瘡病毒(ORFV)的同步快速檢測(cè),基于GTPV的ITR基因及ORFV的059基因,分別設(shè)計(jì)用于普通雙重PCR的引物2對(duì)、用于二聯(lián)實(shí)時(shí)熒光定量PCR的特異性引物及探針2套;探針分別用5′JOE-Eclipse3′及5′FAM-TAMRA3′熒光染料標(biāo)記物進(jìn)行標(biāo)記。結(jié)果顯示,所建立的GTPV-ITR-L-ORFV-059雙重普通PCR方法,可實(shí)現(xiàn)對(duì)GTPV與ORFV的特異性雙重檢測(cè),檢測(cè)敏感度可達(dá)10~4copies/μL DNA;所建立的ITR-059二聯(lián)探針實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法可同時(shí)特異性檢測(cè)ORFV和GTPV產(chǎn)生特異性熒光信號(hào),二聯(lián)探針的檢測(cè)敏感度可分別達(dá)10~(2.87)和10~(2.52) copies/μL DNA。本研究初步建立了可同步特異性檢測(cè)GTPV和ORFV的雙重普通PCR及二聯(lián)探針實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)方法。
[Abstract]:In order to realize the synchronous and rapid detection of Goatpox virus (ITR) and aphthmic ulcer virus (ORF), two pairs of primers for common double PCR were designed based on ITR gene of GTPV and 059 gene of ORFV, and 2 sets of specific primers and probes for dual real-time fluorescent quantitative PCR were designed. The probes were labeled with 5 GTPV-ITR-L-ORFV-059 JOE-Eclipse 3 'and 5 FAM TAMRA3'fluorescent dyes respectively. The results showed that the established GTPV-ITR-L-ORFV-059 double ordinary PCR method could be used to detect the specificity of GTPV and ORFV. The sensitivity of detection is up to 10~4copies/ 渭 L DNA, and the real-time fluorescence quantitative PCR method with ITR-059 dual probe can detect the specific fluorescence signal of ORFV and GTPV at the same time. The detection sensitivity of the dual probe can reach 10 ~ (2. 87) and 10 ~ (2. 52)) copies/ 渭 L DNA respectively. In this study, a double ordinary PCR and a dual probe real-time fluorescence quantitative PCR method for the simultaneous detection of GTPV and ORFV were preliminarily established.
【作者單位】： 云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院云南省熱帶亞熱帶動(dòng)物病毒病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：云南省重點(diǎn)新產(chǎn)品開發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(2014BB014) 云南省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)奶牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)項(xiàng)目[云財(cái)農(nóng)(2009)171號(hào)]
【分類號(hào)】：S852.654

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本文編號(hào)：1663619